Akt与ERK1%2f2在人骨关节炎软骨细胞中的表达.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(5)：889—894 · 889 · [文章编号】 1000-4718(2012)o5—0889—06 Akt与 ERK1／2在人骨关节炎软骨细胞 中的表达术 程 亮 ， 赵洪海 ， 曾国庆 ， 张同恩 ， 王少杰 ， 石 磊 ， 王承云 ， 夏 春 (福建医科大学协和临床医学院，福建 福州 350000；厦门大学附属中山医院骨关节科，福建 厦门361000) [摘 要] 目的：观察蛋白激酶B(Akt)与细胞外信号调节激酶 1／2(ERK1／2)在正常和骨关节炎(OA)软骨 细胞中的表达 ，探讨Akt与ERK1／2在 OA病程中的意义。方法：手术中取5例正常和 18例OA人膝关节软骨组 织，包埋制备切片，免疫组织化学技术观察 P—Akt及P—ERK1／2在正常和 OA软骨组织中的表达 ；培养人软骨细 胞 ，甲苯胺蓝染色、免疫组化鉴定并观察聚集蛋白聚糖及 Ⅱ型胶原在正常和OA软骨细胞中的表达；Westernblot— ting技术检测Akt、P—Akt、ERK1／2、P—ERK1／2、磷酸化70kD核糖体蛋白S6激酶(P—p70S6K)及增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白在正常和OA软骨细胞中表达水平；实时荧光定量PCR技术检测聚集蛋白聚糖及 Ⅱ型胶原在正常和 OA软骨细胞中mRNA表达水平。结果：与正常软骨细胞 比较，OA软骨细胞 内P—Akt和P—p70S6K蛋白表达明 显降低 (P0．05)，且聚集蛋白聚糖和 Ⅱ型胶原 mRNA和蛋白在OA软骨细胞中的表达水平降低 (P0．05)，而 P — ERK1／2和PCNA蛋白表达明显提高(P0．05)。结论：Akt可能通过P—p7OS6K来调控OA软骨细胞外基质聚 集蛋白聚糖及 II型胶原的合成 ，ERK1／2可能通过PCNA来调控OA软骨细胞增殖 ；Akt与ERK1／2可能参与了OA 的病理过程。 [关键词] 骨性关节炎；软骨细胞；蛋白激酶B；细胞外信号调节MAP激酶类；蛋白合成；细胞增殖 [中图分类号] R363．1 [文献标志码] A dot：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．021 Expression 0fAktandERK1／2inhuman osteoarthriticch0ndrOcvtes CHENG Liang ，ZHAO Hong—hat，ZENG Guo—qing ，ZHANG Tong一 n ，WANG Shao—iie，SHILet，WANGCheng—yun ，XIAChun (UnionSchoolofClinicalMedicine，FujianMedicalUniversity，Fuzhou350000，China；DepartmentofOrthopaedics， ZhongshanHospitalofXiamenUnive~i@，Xiamen361000，China；E—mail：chunxia99@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheexpressionofproteinkinaseB (Akt)andextracellularsignal—regulated kinase1／2 (ERK1／2)innormalandosteoarthriticchondrocytes．METHODS：Thesamplesofkneecartilagewereob- tainedfromthenormaldonors(n：5)andthepatients(=18)undergoingtotalkneearthroplastywiththediangosisofos— teoarthritis(OA)．TheexpressionofP—AktnadP—ERK1／2inthenormalandosteoarthriticcartilagetissueswasdetec· tedbythemethodofimmunohistochemistry．Th echondrocyteswereisolatedandidentifiedbytoluidinebluest