CCl4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋白与肝星状细胞MMP-2表达及活性之间相关性研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiolo~ 2009，25(2)：351—355 · 351 · [文章编号】 1000—4718(2009)02—0351—05 CCI4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋 白与 肝星状细胞 MMP一2表达及活性之间相关性研究 刘蕾蕾 ，‘ 陈平圣 ， 刘东风 (东南大学基础医学院病理教研室，江苏 南京 210009) [摘 要] 目的：研究金属硫蛋白(MT)在体内及体外与基质金属蛋白酶一2(MMP一2)表达、活性之间的相 关性。方法：昆明种雄性成年小鼠50只，其中实验鼠40只，对照鼠10只，用CC1诱导小鼠肝纤维化模型。向肝 星状细胞 (HSCs)条件培养基(含有MMP一2)中加不同浓度 MT，使之与 MMP一2酶学共浴，检测 MMP一2活性。 制作小鼠肝组织芯片，天狼猩红染色判断肝纤维化程度。免疫组化法测肝组织 MMP一2、MT蛋白表达，酶图法测 鼠肝组织匀浆和培养基中MMP一2活性。结果：①模型组小鼠肝组织MMP一2和MT蛋白表达水平均随纤维化进 展而呈波浪式交替升高，但二者时相变化相反。②模型组小鼠肝组织 MMP一2活性随实验时间的增加而逐渐升 高，亦有波动。除个别时点外，酶活性与MT表达呈负相关。③肝星状细胞条件培养基与不同浓度的MT直接作用 后 ，MMP一2活性随MT浓度增加活性逐渐降低 (P0．O1)。结论：在小鼠肝纤维化发生发展过程中，肝组织MT 蛋白和MMP一2蛋白表达均有上升趋势，二者间可能存在相互作用；MT蛋白和 MMP一2活性呈负相关 ，前者对后 者可能起抑制作用。 · [关键词] 肝硬化；金属硫蛋白；基质金属蛋白酶一2；小鼠 [中图分类号】 R363 [文献标识码] A Correlationbetweenmetallothioneinandmatrixmetalloproteinase一2ex． pressionandactivityinratsduringCC14一inducedhepaticfibrogenesis LIU Lei—lei，CHEN Ping—sheng ，LIU Dong—feng (DepartmentofPathology，SchoolofBasicMedicalSciences，SoutheastUniversity，Nanfing210009，China．E—mail： chenps@sel1．edu．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetherelevancebetweenmetallothionein(MT)andmatrixmetallopmteinase一2 (MMP一2)expressionandactivityinhepaticstellatecells(HSCs)．METHODS：FiftyKunmingmalemice，weighing 25g±5g，wererandomlydividedintotwogroups：experimentgroup(4Omice)andcontrolrgoup(10mice)．CC14wasused toinducethehepaticfibrosismodelintheexperimentgroup．ConditionedmediumofHSCs(containingMMP一2)wasadd— edatdifferentconcentrationsofMT，thenMMP一2activitywasdetected．Livertissuemicroarraywasused．Collagenfibers wasdetectedbySiriusredstaining．TheexpressionsofMMP一2andMTproteinsinlivertissuesweredetectedbyimmuno- histochemistrystaining．Gelzymographywasusedtoconfirm theactivityofMMP一2inlivertissuehomogenatena