FasL介导的细胞凋亡在Ⅲ期压疮创面形成中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(5)：1006—1008、1019 [文章编号] 1000—4718(2010)05—1006—04 Fas／FasL介导的细胞凋亡在Ⅲ期压 疮创面形成 中的作用 张 恩， 涂 倩， 王艳艳， 张静伟， 姜丽萍△ (温州医学院护理学院，浙江 温州 325035) [摘 要] 目的：观察压疮创面边缘组织、中心组织及周围正常组织中的细胞凋亡现象，探索细胞凋亡与压 疮形成的关系，及在深度压疮创面愈合中的作用与意义。方法：临床收集Ⅲ期压疮组织样本 8例，含正常组织、溃 疡边缘及中心组织。通过常规石蜡切片、原位末端标记 (TUNEL)技术及原位杂交的检测方法确定细胞凋亡数、 Fas／FasLmRNA在溃疡不同部位的定位及表达量的变化规律。结果：正常组织中，Fas／FasLmRNA仅在表皮细胞 有极少量表达，在其它细胞均呈阴性表达 ，TUNEL凋亡阳性细胞极少 ；从溃疡边缘组织到中心组织，FasmRNA阳性 表达逐渐增加并出现在部分成纤维细胞内，中心组织与正常组织 比较，明显差异 ，P0．01，与边缘组织相比(P 0．05)；并且凋亡阳性细胞数逐渐增多，差异显著 ，P0．01。FasLmRNA的表达呈同样的增长趋势，正常组织、边缘 组织及中心组织3组组间差异显著，P0．01。结论：从正常组织到溃疡边缘及中心组织 ，随着 Fas／FasLmRNA的 表达量的增加，凋亡细胞明显增多，说明细胞凋亡在压迫性溃疡形成过程中可能起着重要作用。 [关键词] 褥疮 ；细胞凋亡；Fas／FasLmRNA [KEYWORDS] Decubitusulcer；Apoptosis；Fas／FasLmRNA [中图分类号] R329 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．05．037 压疮 (pressureulcer，PU)又称压迫性溃疡，是临床上常见 无明显渗出，表面覆少量脓苔，基底部可见血性肉芽组织，少 的慢性皮肤溃疡，III期压疮一旦形成 ，深及皮下组织及肌肉， 量坏死组织，其中1例伴感染及轻度炎症反应。每例样本包 经久不愈。尤其是老年压疮患者，细胞外基质生成减少 ，创 含溃疡边缘组织及中心组织两个部位的标本。鉴于伦理原则 面难以愈合…。在创面愈合后期，胶元分解代谢增强，合成 限制，正常组织标本不能来源于本研究对象，而是来源于其他 代谢逐渐减弱，作为合成与分泌胶元蛋 白的主要细胞，成纤 4位患者手术中的遗弃皮肤组织标本为对照，女3例，男 1例， 维细胞的数量相应减少。有研究证实小鼠 Ⅱ。烫伤创面中细 平均年龄48岁。糖尿病患者、下肢静脉溃疡患者、癌症患者已 胞凋亡是成纤维细胞减少的主要原因 ；付小兵等 在糖尿 经有非甾体类抗炎药使用史患者为排除标准。所取标本经 病足溃疡、创伤性溃疡及癌性溃疡中也发现与修复相关的成 4％多聚甲醛溶液固定，脱水，常规石蜡包埋、切片后备用。 纤维细胞的凋亡现象，并提出这种凋亡有可能是影响创面愈 2 Fas／FasL原位杂交检测 合的重要因素。肿瘤坏死因子受体家族 Fas(tumornecrosis Fas及FasL原位杂交试剂盒均购 自武汉博士德生物工 factorreceptorsuperfamily，meH~er6，TNFRSF6)，以及 Fas“g- 程有限公司。试剂盒 内含：胃蛋 白酶 (x10；Pepsin)2mL；预 and(tumornecrosis factorligand superfamily member6， 杂交液2mL；Fas或FasL寡核苷酸探针杂交液2mL；封闭液 TNFSF6)是介导细胞凋亡最主要的路径 J，因此本文通过实 5mL；生物素化鼠抗地高辛5mL；免疫组化 SABC法用过氧 验观察压疮组织中Fas／FasL介导的凋亡现象，探讨其与压疮 化物酶 (SABC—peroxidase，SABC—POD)5mL；生物素化过氧 创面形成及愈合的关系。 化物酶5mL。严格按照说明书步骤，经常规脱蜡、灭活内源