NCA增加心肌收缩力的作用研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(10)：1873—1878 · 1873 · [文章编号] 1000—4718(2011)10—1873—06 NCA增加心肌收缩力的作用研究 钟 鑫 ， 贾洪丽 ，侯俊青 ， 王育文M， 时 飒 ，李志韬 (哈尔滨医科大学。病理生理教研室，黑龙江生物医药工程重点实验室，附属第二医院检验科，黑龙江 哈尔滨 150081) [摘 要] 目的：硝酰基 (HNO)作为一氧化氮 (NO)的单电子还原产物，对活体心脏发挥正性肌力作用。 我们对于这些效果是否由于乙酸l一亚硝基环已酯(NCA，HNO供体)对肌原纤维的直接作用进行了研究。方法： 将大鼠右心室的完整的梳状肌连接在张力换能器与刺激电极之间，肌小节长度设定在2．2—2．3wm之间，K—H液 表面灌流后 (pH =7．4，室温)，Fura一2经玻璃微电极负载进行离子透人法检测[ca“]，同时测定心肌收缩张力 的变化。稳态条件下对最大钙离子活化张力(F )及达到50％活性需要[ca ](ca50)进行测定。Westernblotting 方法检测原肌球蛋白表达的变化。结果：收缩力在 NCA作用下呈剂量依赖性增加 (20—100p~mol／L)。不同频率 作用下(0．5—3．0Hz，NCA20p~mol／L，Ca“0．5mmol／L)收缩力的增加 (P0．O1)和[ca ]瞬变 (P0．05)没 有受到明显的影响。舒张期作用力及[ca2]i不受NCA的影响。与对照组相比，稳态活化过程中NCA(20p~mol／ L)能增加最大钙离子活力 F一[(124．04-15．0)mN／mm vs(90．0-44．2)mN／mm ，P0．05]，降低 ca蜘[(0．39 - 1-0．01)~mol／L (0．57±0．03)p,mol／L，P0．01]，但不影响希尔系数 (3．94 ±0．18 4．92-40．84，P 0．05)。同对照组相比，NCA处理去肌膜心肌收缩力明显增加 (P0．05)。非还原条件下Westernblotting可见肌 原纤维出现交联。巯基还原剂二硫苏糖醇 (DTF，5．0mmol／L)能够阻止并逆转NCA的活动，进一步证实氧化还原 反应依赖HNO的效应。结论：NCA提供的HNO是心脏钙离子增敏剂 ，心肌调节蛋白质巯基翻译后修饰可能是其 靶点作用所在。 [关键词] 硝酰基；乙酸 1一亚硝基环已酯；原肌球蛋白 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．10．004 1一Nitr0s0cVc10hexVlacetateincreasescontractileforceofcardiacmuscle ZHONGXin ，JIA Hong—li，HOU Jun—qing，WANG Yu—wen ，SHISa ，LIZhi— ta01 (DepartmentofPathophysiology，Bio—pharmace~walKeyLaboratory,2DepartmentofLaboratoryMedwine，TheSecond AffiliatedHospital，HarbinMedwalUniversity，Harbin150081，China．E—mail：yuwwl111@yahoo．corn．en) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheeffectof1一nitrosocyclohexylacetate(NCA，anewly—developednitroxyl donor)onmyofibrilsofratheart．METHODS：Trabecularmusclesweredissectedfromtherightventriclesoftherathearts andmountedbetweenaforcetrnasducernadamotorann．ThemusclesweresuperfusedwithK—Hsolution(pH7．4)at room temperature．Fura一2wasloadedi