S100A6通过PDK／Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移.pdfVIP

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2015-08-04 发布于江西
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S100A6通过PDK／Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移.pdf

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中国病理生理

· 1928 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(11)：1928．1933 [文章编号] 1000—4718(2013)11—1928—06 S100A6通过 PI3 Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞 143B增殖和迁移；=l 王海燕，邹正渝，段亮，陈娴，李欢，袁世梅，何通川，周兰 (重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016) [摘要] 目的：研究PI3K／Akt信号通路在 S100A6介导的人骨肉瘤细胞 143B的增殖和迁移中的作用。方法：首先制备重组的人S100A6蛋白(recombinanthumanS100A6，rhS100A6)；rhS100A6与 PI3K抑制剂 (LY294002 和wortmannin)单独或同时处理 143B细胞，其中rhS100A6的终浓度为30mg／L，LY294002和wortmannin的终浓度分别为 10IxmolfL和0．5I~mol／L；采用 Westernblotting分析 143B细胞中PI3K／Akt信号通路相关分子总Akt(total Akt，t-Akt)及磷酸化Akt(phosphorylationofAkt，p-Akt)蛋白的表达变化，MTr检测细胞增殖，Transwetl检测细胞迁移。结果：(1)成功制备rhS100A6蛋白，rhS100A6显著增强 143B细胞的增殖和迁移能力 (P0．05)；(2)rhSl00A6 上调 143B细胞中Akt的磷酸化；(3)与rhS100A6组相比，rhS100A6与LY294002或wortmannin联合处理组 143B细胞的p-Akt减少(P0．05)，细胞的增殖和迁移能力降低，在不同时点细胞的增殖率下降 10．3％一69．7％，细胞迁移率下降37．9％～41．6％，差异均有统计学意义(P0．05)。结论：S100A6促进人骨肉瘤细胞 143B增殖和迁移的作用至少部分是通过激活PI3K／Akt信号通路实现的。 [关键词] S100A6；骨肉瘤；PI3K／Akt信号通路 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．11．002 S100A6promotesproliferationandmigrationofhumanosteosarcomacell line143B throughPDK／Aktsignalingpathway WANG Hai—yan，ZOU Zheng-yu，DUAN Liang，CHEN Xian，LIHuan，YUAN Shi—mei， HET0ng．chuan．ZHOU Lan (KeyLaboratoryofClinicalLaboratoryDiagnostics，MinistryofEducation，CollegeofLaboratoryMedicine，ChongqingMed— icalUniveni~，Chongqing400016，China．E—mail：zhoulanO111@gmail．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofPI3K／AktsignalingpathwayonS100A6一inducedproliferationand migrationofhumanosteosareomacellline143B．METHODS：RecombinanthumanS100A6protein(rhS100A6)waspre— pared．The143BcellsweretreatedwithrhS100A6inthepresenceorabsenceofPI3Kinhibitor(LY294002orwortman— nin)exposure．ThefinalconcentrationsofrhS100A6，LY294002andwortmanninwere30mg／