Survivin-siRNA对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用.pdfVIP

· 1474· 生国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(8)：1474—1478 [文章编号] 1000—4718(2010)08—1474—05 Survivin—siRNA对前列腺癌 DU145 细胞的促凋亡作用木 刘艳波 ，沈维高 ， 芦丽莉 ， 葛 贺 ， 盖晓东 ，赵雪俭 (北华大学基础医学院病理生理学教研室，吉林 吉林 132013；吉林大学前列腺疾病防治研究中心，吉林 长春 130021) [摘 要] 目的：探讨 survivin—siRNA对前列腺癌细胞株DU145的促凋亡作用。方法：构建针对 survivin的 siRNA表达载体psi—Bur，与脂质体和scramble—siRNA(pSi—scrambled)对照组分别转染前列腺癌细胞DU145后， 利用半定量 RT—PCR和Westernblotting分别检测细胞 survivinmRNA及蛋白表达水平；吖啶橙染色、AnnexinV— FITC流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果：转染72h后，实验组细胞的survivinmRNA水平是脂质体 组的0．28±0．07(n=3)，蛋白表达水平是脂质体组的0．34±0．05(n=3)，与对照组比较，差异显著(P0．05)；吖 啶橙染色、AnnexinV—FITC和TUNEL法均观察到实验组细胞呈现明显的凋亡现象。结论：利用 survivin—siRNA 可明显抑制前列腺癌细胞 DU145survivin基因和蛋白表达 ，并诱导细胞凋亡，结果为进一步进行动物体内研究奠定 了基础 。 [关键词] RNA干扰；Survivin；前列腺肿瘤；DU145细胞；细胞凋亡 [中图分类号】 R737．25 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．004 KnockdownofsurvivinusingsiRNA promotesprostaticapoptosisincanc- ercellDU145 LIU Yan—bo ，SHENWei—gao ，LU Li—li，GEHe，GAIXiao—dong ，ZHAOXue · · 2 — — pan (’DepartmentofPathophysiology，SchoolofBasicMedcialSciences，Beihua ，Jilin132013，China；ThePreven- tionandCureCenterofProstateDisease，JdinUniversity，Changchun130021，China．E—mail：gaixiaodong@yahoo． corn．cn；pro_2@ u．edu．ca) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethepromotingeffectsofsurvivin—siRNAonapoptosisofDU145cells． METHODS：TheDNA templatecodingsiRNA againstsurvivinwassynthesized andrecombinantplasmid pSi—surwas constructed．Therecombinantandthetwocontrols，liposomeandpSi—scrambledplasmid，weretransfectedintoDUI45 ceUs．Th eexpressionofsurvivininmRNAandproteinwasdetectedbyRT—PCR andWesternblotting，respectively．Ap- optosisWas measuredbyacridineorangestaining，AnnexinV—FITClabeledflowcytometryandTUNELassay．RESULTS： Comparedtoth