p38MAPK介导高糖下调肾小管上皮细胞表达BMP-7.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(9)：1759—1763 · 1759 · [文章编号] 1000—4718(2010)09—1759—05 p38MAPK介导高糖下调肾小管上皮细胞 表达 BMP一7水 肖 瑛，方开云，石明隽，．~,IJg霞，桂华珍， 郭 兵， 张国忠 (贵阳医学院病理生理学教研室，贵州 贵阳550004) [摘 要] 目的：观察高糖环境中培养的原代肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白一7(BMP一7)表达及 p38丝 裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的作用。方法：原代培养大 鼠肾小管上皮细胞，随机分为正常对照组、高 糖组、p38MAPK阻断剂SB202190+高糖组和高渗组，处理72h后收集贴壁细胞，免疫细胞化学检测 BMP一7和纤 维连接蛋白(FN)表达；Westernblotting检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK(P—p38MAPK)的表达；RT—PCR法检 测 BMP一7和 FNmRNA水平。结果：正常对照组 肾小管上皮细胞 BMP一7主要表达于细胞浆 ，有少量总 p38MAPK与 FN表达，未见P—p38MAPK；高糖状态激活了p38MAPK，P—p38MAPK蛋白表达明显增加，FN的表达 也明显增多而BMP一7的表达显著减少 ；与 SB202190共同培养72h后，P—p38MAPK的表达较高糖组减少约 80％，BMP一7的表达却被显著上调，而FN的表达减少。高渗组与正常对照组比较无明显差异。结论：高糖状态 下肾小管上皮细胞BMP一7蛋白和 mRNA均减少 ，阻断p38MAPK信号通路可促进 内源性 BMP一7增多，提示 p38MAPK可能参与高糖下调肾小管上皮细胞BMP一7的表达。 【关键词] 骨形态发生蛋白质 一7；p38MAPK；糖尿病肾病；大鼠 【中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．09．020 High glucoseinducesdown——regulation ofBM P —-7expression in renal tubularepithelialcellsthroughp38MAPK pathway XIAOYing，FANGKai—yun，SHIMing—juan，LIURui—xia，GUIHua—zhen，GUO Bing，ZHANG Guo—zhong (DepartmentofPathophysiology，GuiyangMedicalCollege，Guiyang550004，China．E—mail：zgzl07@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToobservetheBMP一7expressioninprimaryrenaltubularepithelialceBsculturedwiht hishglucoseandtoinvestigatetheroleofp38MAPK signalingpathway．M ETHODS：Theprimaryrenaltubulra epithelial cellswererandomlytreatedwithnormal ucose，highglucose，co—incubationofhighglucosewithspecificp38MAPKin— hibitorSB202190orD—mnanitolfor72h．TheproteinexpressionofBMP一7andfibronectin(FN)inallthecellswasas- sessedbyhtemehtodofimmunocytochemistry．Theproteinexpressionofp38MAPKandP—p38MAPKwasdeterminedby Westernblotting．ThemRNAexpressionofBMP一7andFNwasdetectedbyRT—PCR．RESULTS：Innomralglucose group，B