Pax-8基因在胚胎心脏发育中的作用.pdfVIP

· 1292· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(7)：1292—1297 [文章编号] 1000—4718(2009)07—1292—06 Pax一8基因在胚胎心脏发育中的作用 章佳颖 ， 来丹丹 ， 褚茂平 ， 王赛斌 ， 施翔翔 ， 倪秋明 ， 黄晓燕 ， 张怀勤 ， 杨德业 (温州医学院附属第一医院心血管内科，温州医学院心血管生物和基因研究所，浙江温州 325000； 浙江中医药大学附属中西医结合医院ICU科，浙江 杭州 310003) [摘 要] 目的：在心脏特异的骨形态形成蛋白受体 IA(thebonemorphogeneticproteinreceptorIA，ALK3)基 因敲除小鼠模型中，纯合子的心脏特异ALK3基因敲除的小鼠死于胚胎中期，同时伴有室间隔缺损。用基因芯片 (microarray)法筛选了ALK3下游基因，并获得下游候选基因(转录因子Pax一8)。为了进一步明确 Pax一8基因在 胚胎心脏发育中的角色，Pax一8基因在小鼠被系统敲除。方法：运用实时荧光定量RT—PCR法检测Pxa一8基因 在小鼠胚胎中的表达情况。运用原位杂交法显示Pax一8基因在小鼠胚胎心脏中的表达部位。TUNEL法检测心肌 细胞的凋亡情况，电镜下观察 Pax一8基因敲除的小鼠心脏组织发育的病理学异常。结果：正常胚胎小鼠9．5、 10．5、11．5、12．5以及 13．5d的Pax一8基因的表达水平以10．5d表达最高。胚胎切片的原位杂交显示 ：转录因子 Pax一8表达在 13．5d的d—MHCCre 一，ALg3”小鼠整个心脏中。Pax一8基因敲除的小鼠心脏表现出形态改变 (心脏呈球形，左心室壁肥厚，室间隔增厚，左室乳头肌肥大)，左心室壁和室间隔心肌组织细胞凋亡率明显增高，同 时线粒体体积较对照组明显缩小并且数量增多。结论：Pax一8基因是心脏较特异的参与心脏正常发育的ALK3下 游基因，并与心肌细胞凋亡有关。 [关键词] 心脏缺损，先天性 ；基因，Pax一8；细胞凋亡 [中图分类号] R363 [文献标识码] A EssentialroleofPax-8 geneduringembryonicheartdevelopment ZHANGJia—ying一，LAIDan—dan ，ZHU Mao—ping ，WANG Sai—bin ，SHIXiang — xiang，NIQiu—uring，HUANGXiao—yan，ZHANGHuai—qin，YANGDe—ye (DepartmentofCardiology，TheFirstAffiliatedHospital，InstituteforCardiovascularBiology＆Gene，WenzhouMedical College，Wenzhou325000，China；IntensiveCareUnit，ZhejiangUniversityofTraditionalChineseMedicine SubsidiaryIn· tegratedChineseandWesternMedicineHospital，Hangzhou310003，China．E—mail：Deyeyang@hotmail．eom) [ABSTRACT] AIM ：ConventionaldeletionofALK3，alsotermedasbonemorphogeneticprotein(BMP)receptor IA，inmicemightresultsinearlyembryoniclethalitywithdefectsinthetrabeculae，interventricularseptum ，andendocar- dialcushion．TheALK3downstream gene—theboxproteinPax一8genewasscreenedusingmicroarray．ThePxa 一8gene knockoutmiceweremadeforinvestigatingtheroleinembryonicc