L—carnosine对NIT-1胰岛细胞的影响及机制.pdfVIP

ChineseJournalof 2012。28(7)：1281—1286 · 1281 · [文章编号] 1000—4718(2012)07—1281—06 L—carnosl。ne对 NIT一1胰岛细胞的影响及机制 周莉莉， 桂书彦， 杨 雁， 袁 刚 (华中科技大学同济医学院附属同济医院内分泌科，湖北 武汉430030) [摘 要】 目的：研究肌肽(L—earnosine)对高糖培养的NIT一1细胞胰岛素分泌、增殖和凋亡的影响及机 制。方法：(1)正常和高糖培养细胞72h，放射免疫法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌，然后分别换不同浓度葡萄糖 和L—earnosine培养，测定胰岛素分泌；(2)细胞分为 c组(11．1mmol／L ucose)、H组 (33．3mmol／Lglucose)、H +A组 (33．3mmol／L uc0se+1mmol／LL—eamosine)和H+B(33．3mmo]／Lglucose+20mmol／LL—carnosine) 组培养72h，BrdU检测细胞增殖，流式细胞术检测凋亡 ，RT—PCR测定bcl一2和caspase一3mRNA的表达，荧光法 检测 easpase一3活性。结果：(1)高糖组细胞胰岛素分泌减少；20mmol／LL—camosine显著增加正常和高糖组胰 岛素分泌(P0．01)，且呈正相关(P0．01)；(2)高糖组细胞增殖和凋亡均增加(均P0．01)，但总体数 目减少；1 mmol／LL—earnosine使增殖增加，凋亡减少(P0．01)；(3)高糖组caspase一3mRNA表达明显增加，bcl一2mRNA 明显减少(P0．05)；1mmol／LL—eamosine使前者明显减少(P0．05)，后者明显增加 (P0．O1)；不同浓度 L— carnosine均明显降低 caspase一3活性。结论：高浓度 L—carnosine可单独刺激细胞分泌胰岛素，低浓度的L— camosine可增加NIT一1细胞增殖并减少高浓度葡萄糖所导致的凋亡。Caspase一3和Bel一2可能参与了L— carnosine保护NIT一1细胞的过程。 [关键词] 肌肽 ；葡萄糖；胰岛素；细胞凋亡 ；NIT一1细胞 [中图分类号] R587．1 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．07．024 EffectsofL—carnosineonNIT一1isletcells ZH0U Li一1i．GUIShu—yan，YANG Yan。YUAN Gang (DepanmemofEndocrinology， Hospital，ro,~iMedwalCollege，HuazhongUniversityofienceTechnology，Wu- han430030，China．E—mail：ynangang88@hotma／／．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheprotectiveeffectofL—carnosineoninsulinsecretion，proliferationandap- optosisofp—cellsimpairedbyhighglucose．METHODS：NIT一1cellswerepre—treatedwithglucoseatconcentrations of11．1mmoL／L(controlleve1)nad33．3mmol／L(hi leve1)for72h，nadthenthecellswerestimulatedwithvarious concentrationsofslucose(O，5and25mmol／L)and／orL—carnosine(0，1and20reotol／L)．Thelevelofinsulininthe mediumwasmeasuredbyradioimmunoassay．TodetecthteeffectofL—camosineonproliferationandapoptosis，