Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(7)：1385—1389 · 1385 · [文章编号] 1000—4718(2010)07—1385—05 Caveolin一1在大鼠骨髓间质干细胞分化 为神经细胞 中的作用 王留东，赵二义， 文全庆， 关文娟，鲁晶晶， 彭 涛，张博爱， 贾延劫 (郑州大学第一附属医院神经内科，河南 郑州450052) [摘 要] 目的：探讨 caveolin一1在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。方法：实验分为未 转染组、转染组 (转染 Rn—caveolin一1一siRNA)、阳性对照组 (转染Rn—MAPK一1controlsiRNA)及阴性对照组 (转染negativecontrolsiRNA)4组。采用 B一巯基 乙醇诱导大 鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察 MSCs转染后荧光表达情况；RT—PCR检测caveolin一1和促分裂原活化蛋白激酶 1(MAPK1)mRNA的表达变化；免 疫细胞化学法检测caveolin一1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF—M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的 表达变化；MTY方法检测细胞存活率。结果：(1)siRNA转染72h，MSCs荧光表达最强，转染率可达 (81．5± 2．8)％；而且转染组MSCs的caveolin—ImRNA转录下降(P0．05)；MTI提示转染组细胞存活率无显著变化 (P 0．05)。(2)§一巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化 ，其中以转染组诱导效果最佳 ，NSE、NF—M的表达率显 著高于其它各组(P0．01)。(3)随诱导时间延长，各组caveolin一1表达持续增加，诱导6d达到峰值，与诱导前、 诱导6h相比有显著差异(P0．05)。此外 ，转染组与其它各组同时点的caveolin一1表达均显著降低 (P0．01)。 结论：以caveolin一1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用。 [关键词] 骨髓间质干细胞；神经元 ；Caveolin一1；RNA干扰；脂质筏 [中图分类号] R329．21 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．028 Roleofcaveolin——1in differentiation ofratbonemarrow mesenchymal stem cellsintoneurons WANGLiu—dong，ZHAOEr—yi，WENQuan—qing，GUANWen—juan，LUJing— jing，PENGTao，ZHANGBo—ai，JIAYan—jie (DepartmentofNeurology，FirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，China．E—mail：fiayan— j／e2002@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheroleofcaveolin一1inbonemarrowmesenchymalstemceils(MSCs)dif- ferentiationintoneurons．METHODS：TheMSCsusedintheexperimentweredividedintonon—transfeetedgroup，tranS． fectedgroup(transfectedwithRn—caveolin一1siRNA)，positivecontrolrgoup(transfectedwithRn—MAPK一1control siRNA)andnegativecontrolrgoup(transfectedwithnegativecontrolsiRNA)．TheMSCswereinducedbyB—MEtodif- ferentiateintoneurons．Th efluorescenceexpresse