CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究.pdfVIP

维普资讯 堡生理 查 hieseJournalofPathophysiology 2006，22(10)：1891—1895 · 1891 · [文章编号] 1000—4718(2006)10—1891—05 ＼ CCK一8抑制 LPS作用下大鼠肺间质 巨噬细胞 NF—KB活性的cAMP—PKA通路研究 高维娟， 许顺江， 丛 斌 ， 李淑瑾， 马春玲， 徐锦荣， 姚玉霞， 谷振勇 (河北医科大学病理生理学教研室，河北 石家庄050017) [摘 要] 目的：用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂 H一89，探讨八肽胆囊收缩素(CCK一8)抑制LPS作 用下大鼠肺间质巨噬细胞 (PIMs)核因子一KB(NF—KB)活性的cAMP—PKA信号通路机制。方法：分离纯化大鼠 PIMs。用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测大鼠PIMs中NF—KB活性 ，用Westernblotting分析 IKB—ot蛋白水平。 结果：正常对照组大鼠PIMs核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF—KB，LPS组细胞内NF—KB活性明 显高于正常对照组 (P0．01)，胞浆中IKB—ot水平显著低于正常对照组 (P0．01)。CCK组和 Fsk组细胞内NF— KB活性和胞浆中IKB—ot含量均无明显差异 (P0．05)。CCK+LPS组和Fsk+LPS组 ，细胞 内NF—KB活性均低于 LPS组(P0．05)，IKB—ot含量均高于LPS组(P0．01)。LPS+CCK+H一89组NF—KB活性高于CCK+LPS组(P 0．01)，而 IKB—ot蛋白水平低于CCK+LPS组 (P0．01)。结论：cAMP—PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的 大鼠PIMs细胞内NF—KB活性升高和IKB—ot蛋白水平的降低，CCK一8的抗炎作用是通过激活 cAMP—PKA信号 通路进而抑制NF—KB活性来实现的。 [关键词] 环 AMP依赖性蛋白激酶类 ；胆囊收缩素；巨噬细胞 ，肺间质；NF—KB；脂多糖类 [中图分类号] R971．9；R342．22 [文献标识码] A InhibitoryeffectsOfCCK 一8onNF—KB activitiesstimulatedbyLPS in ratPⅡ s GAOWei—juan，XUShun—jiang，CONGBin，LIShu—jin，MAChun—ling，XUJin— rong，YAO Yu—xia，GU Zhen—yong (DepartmentofPathophysiology，HebeiMedicalUniversity，Sh~iazhuang050017，China．E—mail：bincong@263．net) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheinhibitoryeffectsofcholecystokininoctapeptide(CCK一8)onnuclearfac· tor—h：B (NF—KB)activitiesstimulatedbylipopolysaccharide(LPS)byusingforskolin，theactivatorofadenylatecyclase， andPKAinhibitorH一89inratpulmonaryinterstitialmacrophages(PIMs)．METHODS：PIMswereisolatednadpurified． EMDAwasappliedtodetectNF—·KB activitiesandWestern blottingwasused toanalyzetheIKB —-otproteinlevelinrat PIMs．RESULTS：TheNF—KBactivitywasnotdetectedinnormal controlratPIMs．TheNF—KBactivityinLPS—rteated