白花丹醌增强TRAIL诱导Kasumi-1细胞凋亡及其机制.pdfVIP

堡 查 望 』ou ofPathophysi0l0gy 2011，27(3)：481—487 · 481 · [文章编号] 1000—4718(2011)03—0481—07 白花丹醌增强 TRAIL诱导 Kasumi一1细胞凋亡 及其机制 徐同鹏 ， 刘立根 ， 蒋雪玮 ， 高 武 ， 谢英华 ， 赵莉敏 ， 韩曦瑶 ， 陆道培 (复旦大学附属上海市第五人民医院血液科，复旦大学血液病研究中心，上海 200240；上海道培医院，上海200240) [摘 要] 目的：观察 白花丹醌、rsTRAIL单独及其联合体外诱导Kasumi一1细胞凋亡的作用，探讨其作用机 制。方法：采用WST一8(CCK一8)比色法测定rsTRAIL、白花丹醌单独和联合应用对 Kasumi一1细胞的生长抑制 率；用流式细胞术、TUNEL法观察并且检测凋亡率 ；实时定量 PeR检测白花丹醌作用后 DR4和 DR5mRNA水平变 化；Westernblotting法检测单独应用及联合应用后 DR5、caspase一3、easpase一8、caspase一9、Bid、Bax及 c—FLIP的 变化。结果：(1)白花丹醌和rsTRAIL单独应用均可抑制 Kaaumi一1细胞的生长，联合应用可增加对Kasumi一1细 胞的生长抑制率且呈时间和剂量依赖性(P0．05)。(2)rsTRAIL(100 L)和白花丹醌(20~nol／L)单用及其联 合使用诱导Kasumi一1细胞AnnexinV阳性细胞百分率分别为(27．7±2．9)％、(256±3．1)％和(52．1±3．3)％。 (3)TUNEL法检测发现联合应用组较单用组凋亡细胞显著增多。(4)实时定量 PeR检测发现白花丹醌可以上调 DR5的表达。(5)Westernblotting发现白花丹醌单独作用及其联合n RAIL应用时上调DR5、激活caspase一8和下 调 c—FLIP表达。结论：白花丹醌具有增强TRAIL诱导Kasumi一1细胞凋亡的作用，其机制与DR5上调、easpase 一 8激活和e—FLIP下调有关。 [关键词] Kasumi一1细胞 ；细胞凋亡；白花丹醌；肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体；基因，DR5；基因，DR4 [中图分类号] R363 [文献标识码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．03．012 Plumbagin enhancesTRAIL—-inducedapoptosisinKasumi——1cells XUTong—peng，LIU Li—gen ，JIANG Xue—We一l，GAOWu ，XIE Ying—hua， ZHAO Li—min ．HAN Xi—yao ．LU Dao—pei (DepartmentofHematology，The ^PeoplesHospitalofShanghai，BolodDiseaseResearchCenter，FudanUniversity， Shanghai200240，China；ShanghaiDapoeiHosptial，Shanghai200240，hCina．E—ma il：liuligen@medma il．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofplumbaginandtumornecrosisfactor—relatedapoptosis—indu— cingligand(TRAIL)onhteapoptosisofleukemicKasumi一1cells．METHODS：Kasumi一1ceilsweretreatedwith plumbaginalone，recombinantsolubleTRAIL(rsTRAIL)aloneorthecombinationofplumbaginwithrsTAR ILtoinduce apoptosis．ThecellproliferationwasanalyzedbyCCK一8assay．Apoptosiswas det