Quantitative+analysis+of+RNA+levels+from+single+hepatocytes+in+vivo：++combined+use+of+real+-time+RT+-PCR+and+laser+microdissection.pdfVIP

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2015-08-04 发布于江西
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中国病理生理

维普资讯理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiologv 2007，23(11)：2285—2288 · 2285 · [ArticleID] 1000—4718(2007)11—2285—04 实验技术 QuantitativeanalysisofRNA levelsfrom singlehepatocytesinVIV0 ： combineduseofreal-—timeRT ．．PCR and lasermicrodissection SHIXin ， JiJrgK1eeff ， ZHU Zhao—wen ， BrunoSchmied。， TANG Wen—hao ， ArthurZimmermann ， MarkusW ．Biichler。 HelmutFriess。△ ， DepartmentofGeneralSurgery，UniversityofHeidelberg，ImNeuenheimerFeldll0． D一69120Heidelberg，Germany；DepartmentofGeneralSurgery，ZhongdaHospital， SoutheastUniversity，Nanjing210009．China；InstituteofPathology，UniversityofBern， Inselspital，CH 一3010Bern，Switzerland．E ～mail：helmut _ friess@med．uni_heidelberg．de) lABSTRACT】AIM：Themannerinwhichacellrespondstoandinfluencesitsenvironmentisuhimatelydeter- minedbythegenesthatareexpressed．Tobetterunderstandcellularfunctions，theisolationofsinglecellsna dsubsequent quantificationoftheexpressedgenesisessentia1．METHODS：Normal livertissuewasobtainedfrom operation，snap— frozeninliquidnitrogenandsectionedincrystat．Individualhepatocytesweremicrodissected．RNA wasextracted，thenre． versetrnascribedandamplifiedusingreal—timequantitativepolymerasechainreaction(PCR)．RESULTS：Singlehepa— tocytesweredissectedbylaserbeam na dcatapultedtothemicrocentrifugecapwhichwas putabovetheslide．Inthisway， cellswerecollected，RNA was extracted．reversetrna scribedtocDNA andusedfornaalysisofRNA express