Rac1介导E-cadherin下调引起的白血病细胞行为改变.pdfVIP

· l670· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(9)：1670—1673 [文章编号] 1000—4718(2010)09—1670—04 Racl介导 E—cadherin下调引起的 白血病细胞行为改变 木 王燕忠， 王继英，唐克晶，王 敏，邢海燕， 田 征，饶 青 (中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所，血液病医院，实验血液学国家重点实验室，天津300020) [摘 要】 目的：确定上皮一钙黏蛋白(E—cadherin)表达下调或缺失在 白血病细胞恶性行为中的作用及分 子机制，最终阐明骨髓微环境与造血细胞相互作用改变在白血病发生中的作用。方法：通过RNA干扰白血病细胞 (Raji细胞)及基质细胞 (293T细胞)中E—cadhefin的表达；细胞黏附实验测定E—cadhefin表达沉默后2种细胞间 的黏附能力改变；MTr法测定干扰后293T细胞上Raji细胞的增殖能力；Westernblotting方法确定干扰后Rho家族 小GTP酶Rae1的表达。结果：RNA干扰E—cadhefin表达后，Raji细胞对293T细胞的黏附能力显著降低，在293T 细胞上的增殖能力显著增强，同时Rac1的表达升高。结论：白血病细胞中E～eadherin表达丧失。引起细胞黏附降 低，增殖能力增强，表明E—cadhefin表达缺失与白血病细胞恶性行为的获得有关 ，Racl可能介导了E—eadhefin表 达缺失引起的细胞行为改变。 [关键词] E一钙黏蛋白；白血病 ；细胞黏附；细胞增殖；RhoGTP酶 [中图分类号] R733．7 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．09．002 Raclmediatesbehaviorsofleukemiccellsin responseto down—regula· tionOfE —cadherin expression WANGYan—zhong，WANGJi—ying，TANGKe—jing，WANGMin，XINGHai—yan， TIANZheng，RAOQing (StateKeyLaboratoryofExperimentalHematology，Instit~eofHematologyBloodDiseasesHospital，ChineseAcademyof MedicalSciencePekingUnionMedicalCollege，Tianfin300020，China．E—ma il：raoqing@gmail．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofE—eadhefindown—regulationonthebehaviorsofleukemiccells anditsmolecularmechanism，andtofurtherdeterminetheroleofabnomr alinteractionsbetweenhematopoieticprogenitor andbonemarrowmicroenvironmentinleukogenesis．METHODS：E—cadhefinwassilencedviasmallRNA interferencein Railleukemiccellsand293Tstromacells．Theabilityofcell—celladhesionwasdeterminedbycelladhesionassayafterE — cadhefinwasknockdown．AdhesionassociatedproliferationwasexaminedbyMTrassayafterplatingRaftceilsonto 293Tcells．TheexpressionofRhoGTPaseRaclwasdetemr inedbyWesternblotting．RESULTS：AfterE—cadhefinwas silencedinR