骨髓单个核细胞移植对肾缺血再灌注后肾小管坏死及细胞凋亡的影响.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 丝 ()； = · l585 · [文章编号] 1000—4718(2008)08—1585—05 骨髓单个核细胞移植对肾缺血再灌注后 肾小管坏死及细胞凋亡的影响 汪 泱， 王志剑， 王共先， 崔苏萍， 谢 平， 黄学明 (南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所，江西 南昌330006) [摘 要] 目的：观察和分析外源性骨髓单个核细胞(BMMNCs)对肾缺血再灌注诱发的肾小管坏死及凋亡 的影响。方法：密度梯度离心法分离获取BMMNCs并行 DAPI标记。制作 sD大鼠肾缺血再灌注损伤模型，通过下 腔静脉进行BMMNCs移植。分别于缺血再灌注后不同时相获取肾脏标本，荧光显微镜下观察DAPI的标记情况， HE染色做肾组织学检测，TUNEL法检测肾组织凋亡细胞，免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原 (PCNA)的表 达。结果：BMMNCs移植组大鼠肾脏组织中可见DAPI荧光细胞，部分存在于肾小管上皮组织中，未见明显细胞坏 死及变性征象，其凋亡细胞计数显著减少，而PCNA阳性细胞数增多。结论：外源性BMMNCs移植可减少缺血再灌 注诱发的肾小管上皮细胞的变性、坏死和凋亡 ，促进缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞的增殖，从而提示BMMNCs 移植有助于缺血再灌注损伤后肾小管的修复及其结构完整性的维持。 [关键词] 骨髓单个核细胞；再灌注损伤；细胞凋亡；肾小管坏死；肾缺血 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effectofbonemarrow mononuclearcellson necroticand apoptoticcell deathinducedbyrenalischemia—-reperfusioninrats WANGYang，WANGZhi—jian，WANGGong—xian，CUISu—ping，XIEPing，HUAN Xue—-ming (Imth~eofUrology，TheFirstAffiliatedHospital，NanchangUniversity，Nanchang330006，China．E—mail：wangyf3cn @sina ．corn [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofbonemarrowmononuclearcells(BMMNCs)onnecroticandap- optoticcelldeathandtotestwhetherBMMNCscna restoretherenaltissueswithischemia—reperfusioninjurytotubular structural integrityinrats．METHODS：BMMNCswere isolatedfrom thefemursandtibiaeofmaleSD ratswithPercoll densitygradientcentrifugationnadlabeledwithDAPIinvhro．Allmodelratsweresubjectedtoclampingbilateralrenal pediclesfor45min，followedbyinjectionofBMMNCsorsalineintotheinferiorvenacava，nadweresacrificedtocollect kidneysat1，2，7，14dafteroperation，respectively．Fluorescencemicroscope wasperformedtodetecttheDAPIlabelsin therenalpraaffinslices．Allkid