红花含药血清对缺氧复氧条件下大鼠肺动脉内皮细胞P-选择素及ICAM-1表达的影响.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(9)：1845—1846、1849 · l845 · [文章编号] 1000-4718(2007)09—1845—03 红花含药血清对缺氧复氧条件下大鼠肺动脉内皮 细胞 P一选择素及 ICAM一1表达的影响 张建初， 张晓菊， 杨卫兵，夏 蕾， 陶晓南， 白 明 ● (华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸科，湖北 武汉 430022) [摘 要] 目的：观察红花含药血清在缺氧复氧条件下对大鼠肺动脉内皮细胞P一选择素(Ps)及细胞问黏 附因子一l(ICAM—1)基因表达的影响。方法：用细胞培养、RT—PCR、Westernblotting、中药血清药理学方法 、免疫 细胞化学染色法等技术 ，观察在常氧、缺氧、复氧及红花含药血清干预等不同条件下大鼠肺动脉内皮细胞 P一选择 素及细胞间黏附因子一l基因的表达变化。结果：缺氧组l、6和 12h各个时点P一选择素及ICAM—lmRNA及蛋 白水平与同时点常氧组明显差异。缺氧lh后再给氧(缺氧复氧组)l、6和12h后P一选择素及ICAM—lmRNA及 蛋白表达均明显高于同时点缺氧组及常氧组；缺氧1h后再给氧同时给予红花含药血清干预各个时点P一选择素 及ICAM—lmRNA及蛋白明显低于单纯缺氧复氧组(P0．05)。结论：缺氧复氧条件下P一选择素及ICAM—l过 度表达，可能参与肺栓塞溶栓后缺血再灌注损伤的机制 ，红花注射液对其有显著缓解作用。 [关键词] P选择素；胞间黏附分子 l；肺；血管内皮细胞；红花 [KEYw0砌)s] P—sdecfin；Intercellularadhesionmolecule—l；Lung；Vasculraendothelialcell；Floscarthami [中图分类号] R363 [文献标识码] A 肺血栓栓塞 (pulmonarythrombembolism，FIE)是 以肺部 疫组化检测Ⅷ因子相关抗原表达以鉴定肺动脉内皮细胞，具 血流动力学障碍为特征的血栓性疾病，血管内皮细胞损伤 体方法按SABC试剂盒说明进行。免疫组化染色肺动脉内皮 和／或功能改变是肺血栓栓塞发病的重要环节，FIE发生后， 细胞阳性 ，胞浆呈清晰棕黄色弥漫分布，说明Ⅷ因子相关抗 肺血管内皮受损，释放出大量血管收缩物质；可造成血管炎 原蛋 白表达，证实为肺动脉内皮细胞。 症反应，又进一步使血小板激活，P一选择素(Ps)是血小板释 3 红花含药血清的制备 放过程中整合到血小板膜上的糖蛋 白，因而也是反映血小板 SPF级雄性Wistar大鼠lO只 自尾静脉注射红花注射液 释放功能变化的特异性指标，细胞间黏附分子 ICAM—l表达 2mL／kg，以后每天1次，共3d，最后 1次注射后lh处死，从 的异常能促进或加剧FIE发生和发展，肺血栓栓塞溶栓后有 腹腔静脉取血，分离血清 ，一2O℃保存。 局部的缺氧和缺血再灌注，既可直接损伤内皮细胞本身，又 4 按给氧情况随机分组 可诱导内皮细胞表达多种黏附分子，这些均可促进血小板激 常氧组：持续通入空气 12h；缺氧组：细胞冠于密闭容 活，缺血缺氧与血小板激活后产生的级联反应互为因果 ，进 器，通入 95％N2、5％CO2混合气 150mL／min持续 12I1_ 一 30min时测容器内O2浓度为0．5％左右，分别在 l、6和l2h 步影响肺血流动力学的改变。本研究分析肺栓塞溶栓后 收集细胞。缺氧再复氧组：置于密闭容器，150mL／min持续 缺血再灌注损伤的部分机制，为临床提供实验基础。 通入95％N2、5％CO2混