喉上皮细胞条件液诱导胚胎干细胞分化为上皮细胞的实验研究.pdfVIP

维普资讯 · 2244· 理生理杂志 ChineseJOUITU1]0fPathophysiology 2006,22(11)：2244-2246 [文章编号] 1000—4718(2006)11—2244 —03 喉上皮细胞条件液诱导胚胎干细胞分化为 上皮细胞 的实验研究米 关 中， 郑亿庆 ， 许耀东， 陈秋坚 (中山大学第二附属医院耳鼻咽喉科，广东 广州510120) [摘 要] 目的：探讨体外用喉上皮细胞条件培养液诱导胚胎干细胞分化为上皮细胞的方法及诱导条件。方 法：将 El4小鼠胚胎干细胞体外培养形成拟胚体后，在人喉上皮细胞条件培养液及因子诱导条件下共培养 14d， 形态学观察并采用免疫细胞化学方法检测上皮细胞的角蛋白ck4、l4、l9蛋白质水平的表达情况。结果：在诱导 14d的培养系统中较对照细胞可见更多上皮样细胞出现，免疫细胞化学染色显示上皮样细胞胞浆中可见角蛋 白 ck4、l4、l9均有表达。结论：胚胎干细胞在喉上皮细胞条件培养液诱导条件下可形成上皮样细胞 ，为组织工程制 作人工喉上皮材料奠定了实验基础。 [关键词] 胚胎干细胞；喉；上皮细胞 ；角蛋白 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Directeddifferentiation ofembryonicstem cellsintoepithelialcellsbyCO - · culturewith human laryngealepithelialcellconditionedmedimu GUANZhong，ZHENGYi—qing，xUYao—dong，CHENQiu—jian (DepartmentofEⅣ ，TheSecondAffiliatedHospital，Sunrat—senUniversity，Guangzhou510120，China．E—mail： yiqingzheng@hotma il．com) [ABSTRACT] AIM：Toexplorethecultureandinductiveconditionforthedirecteddifferentiationofembryonic stem cellsintoepithelialcellsinhumanlaryngealepithelial cellconditionedmedium．M ETHODS：El4murinestem cells wereinducedintoembryoidbodyinvitrofirst，thenthecellsofembrvoidbodywereculturedintheinductionsystem contai— ninghumanlaryngeal epithelial conditionedmedium andepithelialt’}I1growthfactors．Onday14ofculture．sampleswere detectedofrthecytokeratins4，14，19expressionsatproteinleve1．Morphologyofthecellswasalsoobservedundermicro— scope．RESULTS：Duringtheprocessofepithelialinduction，cellswithepithelial cellmoprholoyg wereseenundercon— trastmicroscope．Immunofluorescentassayshowedthatcytokeratins4，14，and19wereallexpressedatproteinlevelindif- ferentiatedcel1．CONCLUSION ：Thisstudysuggeststhatepithelialcellscouldbeinducedfrom thedirecteddifferentia．