环境内分泌干扰物双酚A对小鼠甲状腺滤泡上皮细胞增殖和凋亡的影响.pdfVIP

· 1076 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(6)：lo76．1080 [文章编号] 1000-4718(2013)06-1076—05 环境 内分泌干扰物双酚 A对小鼠甲状腺滤泡上皮 细胞增殖和凋亡的影响 刘泽兵 ， 王 丽 ， 叶宣光 ， 于秀杰 ， 张友元 (复旦大学附属金山医院病理科，上海 201508；天津医科大学内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室，天津 300070) [摘 要】 目的：探讨环境内分泌干扰物双酚 A(BPA)对小鼠甲状腺原代培养细胞增殖和凋亡的影响。方 法：取雌性 BALB／enu／nu小鼠甲状腺组织，采用胶原酶 L／中性蛋白酶联合消化并进行滤泡上皮细胞培养 ，Western blotting检测甲状腺球蛋白表达对细胞进行鉴定。采用不同浓度的BPA干预稳定培养48h的小鼠甲状腺原代培养 的滤泡上皮细胞，作用24h后，光学显微镜观测干预前后细胞生长状态的变化 ，流式细胞术分析细胞增殖和凋亡， rea1．timePCR法和免疫细胞化学染色法测定干预前后肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体 1(TRAIL-R1)mRNA 和蛋白的表达变化。结果：原代培养的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞随BPA刺激浓度的增加，生长状态呈现先促进后 抑制的趋势；O．01—0．1~mol／LBPA作用24h后，细胞增殖呈剂量依赖性增长 ，0．1tunol／LBPA可显著刺激细胞 增殖(P0．05)，而 1~mol／LBPA刺激后则表现为细胞增殖水平显著下降(P0．05)；0．1Ixraol／LBPA刺激后凋 亡指数减低 (P0．05)；0．1Izrnol／L和 1i~moL／LBPA刺激后TRAIL—R1mRNA表达均显著下调(均P0．05)，蛋白 表达与mRNA表达结果趋势一致。结论：低、中浓度 BPA可刺激原代培养的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞增殖并抑制 细胞凋亡，而高浓度BPA对细胞主要表现为毒性损害作用。BPA对细胞凋亡的影响可能与TRAILR·1相关途径 有关。 [关键词] 双酚A；细胞增殖；细胞凋亡 ；甲状腺 [中图分类号] R736．1 [文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．10004·718．2013．06．021 EffectsofenvironmentalendocrinedisruptorbisphenolA onproliferation andapoptosisofmousethyroidfollicularepithelium cells UUZe-bing，WANGLi，YEXuan-guang，YUXiu-jie，ZHANGYou-yuan (DepartmentofPathology，JinshanHospitalofFudanUnwe~ity，Shanghai201508，China；KeylaboratoryforHormone andO~lopmentofMinisterofHealth，InstituteofEndocrinology，TianjinMedicalUniversity，Tianfin300070，China．E— ma／／：yypertuss／s@163．corn) [ABSTRACT] AIMIToinvestigatetheeffectofenvironmentalendocrinedisruptorbisphenolA (BPA)onhte proliferationandapoptosisofprimarilyculturedmousethyroidfollicularepihteliumceHs(TFECs)．METHODS：Thethy· roidsoffemaleBALB／cnu／numiceweredigestedbyhtecombinationofcollagenaseIanddispase．Th eisolatedTFECs weieculturedna didentifiedbyWestern blotting．Afterculturedfor48h，theTFECswerestim