环氧合酶抑制剂NS-398增强放射诱导的肝癌细胞凋亡.pdfVIP

· 128 · 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(1)：128—132 [支章编号] 1000-4718(2009)O1—0128—05 环氧合酶抑制剂 NS一398增强放射 诱导的肝癌细胞凋亡水 竺鑫丽 ， 胡立宽 ， 周林福 ， 付 雷 ， 张 帅 ， 许 曼 (山东大学 齐鲁医院肿瘤中心 2医学院，山东济南 250012； 浙江大学医学院分子生物学实验室，浙江 杭州 310003) [摘 要】 目的：探讨环氧合酶一2(COX一2)选择性抑制剂 NS一398对放射诱导的人肝癌细胞HepG2凋亡 的影响及可能作用机制。方法：应用MTT法检测NS一398对细胞的抑制率；透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态 学变化，流式细胞术(FCM)定量检测细胞凋亡；实时荧光定量 PCR检测凋亡相关基因 一2、bax及 caspase一3 mRNA表达；Westernblotting检测 Bcl一2、Bax蛋白表达；比色法分析caspase一3酶活性变化。结果：NS一398对 HepG2细胞的生长抑制作用呈时间与剂量依赖性；电镜下处理组细胞呈现典型的凋亡形态学变化，Ns一398显著 增加放射诱导的细胞凋亡，上调baxmRNA、Bax蛋白及 caspase一3mRNA表达，并增强caspase一3酶活性 ，而Bel一2 表达无明显变化(P0．05)。结论：NS一398能增加放射诱导的HepG2细胞凋亡，其机制可能与上调Bax、easpase 一 3表达，上升Bax／Bcl一2比例，激活线粒体凋亡通路，活化caspase一3，最终诱导细胞凋亡相关。 【关键词] 环加氧酶抑制剂 ；肝肿瘤；细胞凋亡；HepG2细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码】 A ／nvitroenhancementofradiation-—inducedapoptosisinhumanhepatoma celllineHepG2byaselectiveihn ibitor0fcycl00xygenase一2enzymeNS ． 398 ZHUXin—li，HU Li—kuan一，ZHOU Lin—fu ，FU Lei，ZHANG Shuai‘XU Man ， (CancerCenter，QiluHospital，MedicalSchool，ShandongUniversity，Jinan250012，China；LaboratoryofMolecular Biology，ZhejiangUniversitySchoolofMedicine，Hangzhou310003，China．E—mail：HLK8868@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM ：ToinvestigatethepossibleroleofNS一398，aselectiveinhibitorofcyelooxygenase一2en— zyme，inradiation—inducedapoptosisofhuman hepatoma celllineHepG2 in vitro．METHODS：Hepatomacellline HepG2wastreatedwithvariousconcentrations(25，50，100，200~moL／L)ofNS一398beforeMT／assaywasusedtoe— valuatethecytotoxicityofNS一398．Transmissionelectronmicroscopy(TEM)wasusedtoobservethechangesofapoptosis inmorphology．FCM wasperformedtoquantifytheapoptoticpercentage．Real—timePCR wa$usedtode