高糖作用的肾小球系膜细胞SnoN%2fSki蛋白表达及泛素化降解.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(3)：506—511 [文章编号] 1000-4718(2012)03-0506—06 。___ l-__ ‘j 同 糖作用的肾小球系膜细胞 SnoN／Ski蛋 白表达及泛素化降解 南庆玲 ， 阳 诚槲， 徐 勇 (泸州医学院附属医院内分泌科 ，四川 泸州 646000) [摘 要] 目的：观察高糖作用的大鼠肾小球系膜细胞内核转录共抑制因子SnoN／Ski及泛素连接酶Arkadia的 表达变化，初步探讨 SnoN／Ski泛素化降解在糖尿病。肾病中的作用。方法：将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别设 正常对照组 、高糖甲组(培养基含20mmol／L葡萄糖)、高糖乙组 (培养基含30mmol／L葡萄糖)、高糖 +MG132组 (30mmol／L葡萄糖培养基中预先加入0．5p~mol／L特异性泛素蛋白酶体抑制剂 MG132)和甘露醇组。用蛋 白免疫印 迹技术和免疫荧光染色一激光共聚焦显微镜检测各组细胞 SnoN／Ski及Arkadia蛋白的表达。结果：(1)正常系膜细 胞中SnoN／Ski蛋白大量表达，Arkadia蛋白表达较弱。(2)高糖作用后SnoN／Ski蛋白表达减弱，Arkadia蛋 白表达增 强(P0．05)。(3)与高糖组比较 ，高糖加入MG132后 SnoN／Ski蛋白表达增加 ，Arkadia蛋白表达减弱(P0．01)。 (4)甘露醇组与正常组比较SnoN／Ski及Arkadia蛋白表达均无明显差异(P0．05)。结论：(1)高糖可通过泛素蛋白 酶体途径降解SnoN／Ski蛋白致其低表达。(2)E3连接酶Arkadia参与了高糖诱导的SnoN／Ski的泛素化降解 。 [关键词] SnoN／Ski；泛素一蛋白酶体通路 ；Arkadia；糖尿病肾病 [中图分类号] R587．1 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．03．021 Ubiquitin—-dependentdegradationofSnoN／Skiproteininglomerularme- sangialcellsinducedbyhigh glucose NANQing—ling，YANGCheng，XUYong (DepartmentofEndocrinology，TheAffiliatedHospital，LuzhouMedicalCollege，Luzhou466000，China．E—mail：xywyll @ yahoo．corn．cn [ABSTRACT] AIM：ToobservetheproteinexpressionofSnoN／SkiandubiqutinligaseArkadiainratglomernlar mesangialcells(GMCs)exposedtothehighglucose．METHODS：CulturedratglomerularmesangialHBZY一1ceils weredividedintocontrolgroup，20mmol／Lglucosegroup，30mmol／Lglucosegroup，30mmol／Lglucose+MG132group (culturemedium containing30mmol／Lglucoseand0．5tzmol／LspecificproteasomeinhibitorMG132)，andmannitol group．TheexpressionlevelsofSnoN，SkiandArkadiaweremeasuredbyWestern blottinganalysis，immunofluorescence andlaserscanningconfocal microscopy．RESU