高氧、维甲酸对早产大鼠肺成纤维细胞MMP-2及TIMP-2表达的调控.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(3)：555—561 · 555 · [文章编号] 1000—4718(2009)03—0555—07 --．】 口 同氧、维 甲酸对早产大鼠肺成纤维细胞 MMP一2及 TIMP一2表达的调控术 李文斌， 常立文 ， 容志惠， 汪 鸿， 刘 伟 (华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 ，湖北 武汉430030) [摘 要] 目的：探讨维甲酸 (RA)对高氧暴露下早产大鼠肺成纤维细胞 (LFs)基质金属蛋白酶一2(MMP一2) 及其特异性组织抑制物～2(TIMP一2)表达的影响。方法：建立原代培养的早产大鼠LFs高氧暴露模型，采用半定 量 RT—PCR方法检测MMP一2和TIMP一2mRNA表达，明胶酶谱法检测MMP一2酶原和活酶表达，Westernblot— ting检测其磷酸化和总的ERK1／2、JNK1／2、p38和c—Jun表达。结果：(1)与对照组比较，高氧可促进早产大鼠 LFsMMP一2mRNA及典酶原和活酶表达 (P0．05，P0．01)，同时使其 P—ERK1／2、P—JNK1／2、P—p38和 P—c—Jun表达水平显著提高(P0．01，P0．05)；(2)RA能不同程度下调高氧诱导的早产大鼠LFsMMP一2mRNA 高表达和明显降低其P—JNKI／2、P—p38和P—c—Jun表达 (P0．O1，P0．05)，但进一步提高p—ERK1／2表达 ； (3)高氧 、RA对TIMP一2mRNA和总ERK1／2、JNK1／2、p38及 c—Jun表达无明显影响。结论：高氧暴露通过激活 MAPKs信号转导通路(主要是JNK和p38)使 c—Jun磷酸化水平提高，促进 MMP一2表达和激活；RA通过抑制 JNK和p38磷酸化，下调MMP一2表达与活化 ，从而拮抗高氧诱导的肺损伤。 [关键词] 高氧症；维甲酸；肺成纤维细胞；早产大鼠；基质金属蛋白酶一2；有丝分裂素激活蛋白激酶素 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effectofretinoicacidonhyperoxia--inducedexpressionandregulationof matrixmetalloproteinase——2and tissueinhibitorofmetalloproteinase．．2 inprematureratlungfibroblasts LIWen—bin，CHANG Li—wen，R0NG Zhi—hui，WANG Hong，LIU Wei (DepartmentofPediatrcis，ronaiiHospital，TongiiMedicalCollege，HuazhongUnwe~ityofScienceandTechnology，Wu— han430030。China．E—mail：1wchang@tjh．tjmu．edu．ca) [ABSTRACT] AIM ：Tostudytheeffectofretinoicacidonthehyperoxia—inducedexpressionandregulationof matrixmetalloproteinase一2(MMP一2)andtissueinhibitorofmetalloproteinase一2(TIMP一2)inprematureratlungfi- broblasts(LFs)．METHODS：TheprimaryprematureratLFswereculturedinvitroandthenexposedinhyperoxia．The levelsofMMP——2andTIMP——2mRNAweredetectedbysemi——quantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction (RT—PCR)．MMP一2activitywasmeasuredbyzymography