黄芪皂苷对培养的小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2 24()；鱼 =鱼垫 · l625 · [文章编号] 1000—4718(2008)O8—1625一o4 黄芪皂苷对培养的小鼠腹腔 巨噬细胞的激活作用 杨小敏， 张天一 ， 朱昌来， 林 琳 (南通大学神经再生重点实验室，江苏 南通 226001) [摘 要] 目的：观察黄芪皂苷(As)对巨噬细胞的免疫激活作用，探讨其调节机体免疫功能的机制。方法： 在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的As后，观察其对巨噬细胞一氧化氮(NO)合成及对肿瘤细胞杀 伤活性的影响；透射电子显微镜观察巨噬细胞的超微结构改变；应用激光扫描共聚焦显微术，结合荧光探针Fluo一 3／AM、观察As引起巨噬细胞内ca 的变化。结果：50—800mg／LAS作用细胞24h后，NO分泌量增加，杀瘤活性 加强，且呈量 一效依赖关系。4OOmg／LAS作用细胞24h后 ，透射电子显微镜观察可见细胞表面突起增多、增粗、 增长；滑面内质网、溶酶体增多；50—800mg／LAS作用细胞4h后，细胞内ca 的浓度升高，并与药物浓度呈正相 关。结论：AS可通过使巨噬细胞 NO分泌水平增加、细胞毒作用增强从而增强巨噬细胞的免疫调节功能，其调节机 制可能与其引起细胞内ca“的浓度升高有关。 [关键词] 黄芪皂苷；巨噬细胞；H：：细胞；一氧化氮；钙 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Activatingeffectofastragalus saponin onmouseperitonealmacrophages invitro YANGXiao—min，ZHANG Tian—yi，ZHU Chang—lai，LIN Lin (KeyLaboratoryofNeuroregeneration，NantongUniversity，Nantong226001，Chian．E—mail：yx163．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheimmunomodulatoryeffectofastragalussaponin(AS)onmacrophagesand explorethemechnaism ofitsimmunomodulation．METHODS：ByaddingdifferentconcentrationsofAS intocultured mouseperitonealmacrophagesinvitro，theinfluenceofASonthesynthesisofnitrooxide(NO)wasdetectedbyNOkit (enzymaticmehtod)．MTTassayWasusedtodeterminethecytotoxicityofmacrophagesinducedbyAS．Themorphological chnagesofmacrophageswereobservedundertransmissionelectronmicroscope．LSCM andspecificityfluorescentprobeFluo 一 3／AM wereappliedtoobservehtechangeofCa“ in macrophagesinducedbyAS．RESULTS：ASsignificnatlyin— creasedNO synthesis，enhancedtheeffectsofmouseperitonealmacrophagesonkillingcarcinomacells．Cellsurfacepro— jectionexhibitedmultiplication，becomingthickeningnadgrowthlongerviatransmissionelectronmicroscope．Increasein intracel