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中国病理生理
维普资讯
· 270 · 国癍理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008,24(2):270—274
[文章编号] 1000—4718(2008)02—0270—05
活化蛋 白C对脂多糖诱导的人脐静脉
血管内皮细胞凋亡的影响研究
陈 平, 章永平, 乔敏敏, 袁耀宗
(上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海200025)
[摘 要] 目的:观察不同剂量活化蛋白C(APC)对脂多糖 (LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞 (HUVECs)
凋亡的作用。方法:将培养成功的HUVECs通过LPS(1mg/L)孵育诱导细胞凋亡模型,并给予APC(10 g/L)或
APC(50 g/L)建立药物治疗组,同时设立正常对照细胞组和单独 LPS(1mg/L)诱导细胞凋亡组 。应用电镜观察
细胞超微结构;DNAladder与TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡情况;Annexin—V/PI双标记行流式细胞仪测定定
量观察细胞凋亡率。同时采用 MTr法测定细胞存活率和Westernblotting测定增殖细胞核抗原 (PCNA),以观察细
胞的增殖变化。结果 :通过细胞形态,DNAladder和TUNEL荧光染色发现单独LPS诱导组的细胞可见明显的凋亡
现象,而通过APC治疗组的细胞凋亡改变明显减轻和细胞凋亡率下降,同时细胞存活率和PCNA表达率增高,尤其
在 50 g/L时,与单独LPS诱导组细胞比较差异显著(P0.05)。结论 :APC拮抗 LPS诱导的血管内皮细胞凋亡
并促进细胞的增殖,发挥保护细胞的作用。
[关键词] 活化蛋白C;脂多糖类;细胞凋亡;人脐静脉血管内皮细胞
[中图分类号] R363 [文献标识码] A
EffectofactivatedproteinC onapoptosisinhumanmu bilicalvein endo·
thelialcellsinducedby lip0p0lysaccharide
CHENPing,ZHANGYong—ping,QIAOMin—min,YUANYao—zong
(DepartmentofGastroenterology,RuijinHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200025,
China.E—mail:yyz2,8@medmail.COrn.ca)
[ABSTRACT] AIM :TostudytheeffectofactivatedproteinC (APC)atdifferentconcentrationsonapoptosisof
humanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)inducedbylipopolysaeeharide(LPS).METHODS:TheHUVECs
wereinducedbyLPS(1.0mg/L)asapoptoticmodelthatwasadministeredbydifferentconcentrationofAPC(10 g/Lor
50 L).Meanwhile,thecontrolgroupandinducedapoptosisrgoupinducedbyLPS(1.0mg/L)stimulationwerealso
setup.Thechangesofcellularultrastructureswereobservedunderelectronmicroscope.TheDNA ladderandTUNELfluo-
reseefltstainingweremeasuredincells.Annexin—V/PIdoublestainingWas usedtomeasurethecellapoptosisrateby
flowcytometry
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