抗钠钙交换体特异位点抗体对心肌钠钙交换电流的激活作用及其与钙通道、钠泵的交叉反应.pdfVIP

维普资讯 · 1078· 主垦 理生理苤查 bineseJournalofPathophysiology 2008，24(6)：1078—1083 [文章编号] 1000—4718(2008)06—1078—06 抗钠钙交换体特异位点抗体对心肌钠钙交换 电流的 激活作用及其与钙通道、钠泵的交叉反应 白晓洁， 吴博威 (山西医科大学生理学教研室，山西 太原030001) [摘 要] 目的：通过制备抗钠钙交换体 (NCX)特异位点 (l重复序列 HNFIAGDLGPSTIVGSAAFNMF ) 抗体探讨激动NCX的新途径 ，同时观察该抗体对于细胞膜上其它主要的离子通道和转运蛋 白是否具有交叉反应。 方法：将按照上述序列合成的肽段作为抗原，对健康Wistar大鼠进行连续9周的主动免疫，用SA—ELISA法检测 其血清中抗体的滴度，并对抗体滴度大于1：640的样本血清进行IgGs的提取和纯化。用膜片钳全细胞电流记录方 法观测在 10nmol／L、20nmol／L和40nmol／L时该抗肽抗体对大鼠心室肌细胞钠钙交换电流 (I )、L一型钙电流 (I一)、钠泵电流(I-pump)、钠电流(I)、瞬时外向钾电流 (I )、内向整流钾电流 (I)以及豚鼠延迟整流钾电流 (I)的影响。结果：该抗肽抗体对于内向和外向的I 电流成分均产生剂量依赖性地激活作用，同时对 ILl。和 I kpu也有一定程度的激动，对检测的其余电流无显著影响。结论：该抗NCX特异位点抗体可以激动大鼠心肌钠 钙交换电流，并且与 L一型钙通道和钠泵具有交叉反应。 【关键词] 钠一钙交换；抗体；钙通道；钠泵 ；心脏 [中图分类号] R363 [文献标识码] A SitespecificantibodyofNa／Ca exchanger stimulatesNa／Ca exchanger currentandhascross—reactiOn 、vithCachannelandNapump BAIXiao— jie。WU Bo—wei (DepartmentofPhysiology，ShanxiMedicalUniversity，Taiyuan030001，China．E一．tail：baixiaojie一1973@yahoo．corn． cn) [ABSTRACT] AIM：TolookforanewwayofNCXactivationbytheantibodyagainstthespecificsiteofNCX (ctlrepeatsequence124HNFIAGDLGPSTIVGSAAFNMF145)，andtoobservethecross—reactionofthenatibodytootherion channelnadtrnasporter．M ETHODS：Synthesizedpeptideasantigenwasusedtoimmunizeratfor9weeks．Thetiterof theantibodywasmonitoredbyELISA．IgGsinthepositivesera(titer1：640)waspurifiedbyaffinitychromatography withaMabTrapkit．TheeffectsofthepurifiedIgGsontheionchannelandtransporter(INa／c，INpup，Ic一L，Itk0，Ikl， IK)atconcentrationsof10nmol／L，20nmol／Land40nmol／Lwereobservedbywholecellvoltageclamptechnique．RE- SULTS：Th epurifiedIgGenhancedI№／c，Ic Lna dINa／k邮