卵巢癌血浆DNA含量及其与肿瘤基因表达的相关性分析.pdfVIP

维普资讯 · 1642· 理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007,23(8)：1642-1644 [文章编号] 1000—4718(2007)08—1642—03 卵巢癌血浆 DNA含量及其与肿瘤 基因表达的相关性分析 吴裕 中 ， 石一复 ， 朱雪琼 (。浙江大学医学院附属妇产科医院，浙江 杭州 310006；温州医学院附属第二医院妇产科，浙江 温州325000) [摘 要] 目的：探讨上皮性卵巢癌血浆DNA改变特点及其与肿瘤基因表达的相关性。方法：采用 DNA定 量检测试剂盒检测35例原发性上皮性卵巢癌、20例 良性上皮性卵巢肿瘤和20例健康对照血浆DNA含量，并以免 疫组织化学方法检测卵巢癌肿瘤组织 Survivin、FHIT和nm23一H1的表达状况。结果：健康组 、良性组及恶性组血 浆 DNA水平分别为 16．5 g／L、87．6 g／L和630．2 g／L，恶性组与健康组 、良性组相比，均有明显差异 (P 0．O1)；上皮性卵巢癌组血浆DNA水平与有无伴发腹水及淋巴结转移有明显相关性，其血浆DNA平均水平在术后 明显下降。上皮性卵巢癌肿瘤组织nm23一H1和Survivin蛋白表达的阳性率分别为68．57％和60．00％，FHIT蛋白 的缺失率为 17．14％，血浆 DNA水平明显差异仅可见于nm23一H1蛋白不同表达组别间。结论：上皮性卵巢癌患 者循环DNA含量明显高于对照组，而其水平变化则可能与肿瘤的侵袭转移能力相关。 [关键词] 卵巢肿瘤 ；DNA；基因表达 [KEYWORDS] Ovarianneoplasms；DNA；Genesexpression [中图分类号] R363 [文献标识码] A 近年来的研究发现，在肿瘤病人的外周血 (血浆或血清) 减灭术或大块肿瘤切除术 ，尽可能切除原发灶和转移灶，其 中含有相当数量的循环 DNA，其量明显高于正常，虽然其来 中24例行盆腔淋巴清扫或活检术。 源 尚不能完全明确，但经研究发现，在许多肿瘤类型循环 2 循环 DNA提取和定量 DNA具有着与肿瘤原发灶相一致的基因异常改变，这使得非 所有研究对象均取5mL外周静脉血，EDTA抗凝，室温 创伤性早期诊断肿瘤、及时发现肿瘤的复发或转移、监测疗 下离心提取血浆 ，血浆样品分装后保存于一20℃以备用。以 效、预测预后成为可能…。目前国内外有关卵巢癌患者循环 QIAampDNABloodMiniKit(Qiagen)提取所有研究对象的血 DNA的研究均甚少，且结论并不一致 ，本研究拟通过分析原 浆 DNA(实验步骤按试剂说明进行)。以DNADipStick (In— 发性上皮性卵巢癌 (epithelialovariancancer，EOC)患者循环 vitrogen)试剂盒确定血浆 DNA水平，该试剂盒可分析含量介 DNA的水平及其改变与卵巢癌临床病理参数的关系；并同时 于0．1—10mg／L之间的DNA样品，实验步骤按试剂说明进行。 分析其水平改变与肿瘤组织基因表达的相关性，探讨上皮性 3 免疫组织化学分析 应用免疫组化二步法分析恶性肿瘤组所有研究对象组 卵巢癌患者中循环DNA变化的特点及其意义，为其在临床中 织标本 Survivin、FHIT及 nm23一H1蛋 白的表达状况。鼠抗 的应用提供理论支持。 人Survivin(MS一1203)单克隆抗体为 NeoMarkers公司产品， 材 料 和 方 法 兔抗人FHIT多克隆抗体和鼠抗人nm23一HI单克隆抗体均 购 自北京中山生物技术有限公司，抗体工作浓度分别为1：50、 1 临床资料