前列腺癌细胞中核因子κB家族成员调控乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂表达的机制.pdfVIP

·165· ．基础研究． 前列腺癌细胞中核因子KB家族成员调控 乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂表达的机制 马亮 沈雅颖 周鹏 周琚国风 【摘要】 目的探讨核因子KB(NF—KB)家族成员(RelA、p50、RelB和p52)调控抑癌基因乳腺丝 氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)表达的可能机制。方法采用Westernblot法检测前列腺癌细胞株 DUl45、PC-3和LNCaP中NF-KB家族成员和Maspin蛋白的表达情况。采用RNA干扰技术结合 Western blot法，检测RelB或RelA沉默对前列腺癌DUl45细胞中Maspin蛋白表达的影响。采用流 式细胞术检测RelB沉默后前列腺癌DUl45细胞的死亡情况。通过转染RelB表达质粒并建立稳定 表达细胞株，观察过表达RelB对前列腺癌PC-3细胞中Maspin蛋白表达的影响。结果RelA、pSO、 RelB和p52蛋白在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株DUl45和PC-3中呈持续性高表达，其中RelB蛋 白在DUl45细胞中的表达最为显著。Maspin蛋白在LNCaP和DUl45细胞中低表达，而在PC-3细胞 中高表达。在DUl45细胞中。沉默RelB可以诱导Maspin蛋白表达上调，同时促进细胞死亡[死亡率 为(13．3±4．2)％]。在PC-3细胞中，过表达RelB可抑制Maspin的内源性表达。RelA沉默对DUl45 细胞中Maspin蛋白的表达无显著影响。结论在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株中，NF·xB经典与 非经典通路蛋白持续性活化。RelB与Maspin的表达呈负相关性。RelB负性调控了内源性Maspin的 表达，进而影响了前列腺癌细胞的存活。ReLA并不参与对Maspin表达的调控。 【主题词】前列腺肿瘤；核因子KB；人v-tel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物B； 乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂 Ⅻ-xBsubunits in invitro Ya· regulatenmspinexpression prostate伪n啷cellsMA撕，SHEN 800chow 一ng，ZHOUPe，孵，ZHOUJun，GUOFeng．CentralLaboratory，theFirst够l池耐Hospitalof universily，Suzhou215006，China Corresponding伽lJlor：GUO Feng，Email：和咖’927@sl-如．edIL讲 To howNF·KB membem in 【Abstract】Objective explore family regulatemaspinexpression cancercells．MethodsThe of subunitsand w舶detectedWestern NF-KB prostate expression maspin by blot in cancer LNCaPcelllines．RNAinterferenceWas to analysisprostate DUl45，PC-3，and performed whetherRelB-orReiA-deletionaffectescelldeath∞wella8the of subunitsand NF-KB ana