纤维素酶菌种的鉴定和筛选.pdfVIP

维普资讯 饲封，蝗五， 7 20OO年第 13期 — 9 一 7，， 纤维素酶是分解植物纤维素的 1．5 纤雏素酶活力的测定 酶，主要有 B一1，4一葡聚糖水解酶 1．5．1滤纸崩溃法 (cl酶) 200 (cx酶)和 0—1，4一葡聚糖纤维二 mL三角瓶中加8mL粗酶液和 2 糖水解酶(c酶)，能将植物纤维分 mL0．2mol／L、pH4．6醋酸缓冲 解为葡萄糖，能破坏植物细胞壁使 液，加 2张 1×1till大小的新化 其释放蛋白质、淀粉等营养成分，能 滤纸，45 保温，反复振荡 (100 消除饲料中非淀粉多糖的抗营养作 ~／mln)，观察滤纸崩溃程度，记 用，提高饲料利用率和畜禽生产性 录滤纸完全消失所需时间。用对 能。饲用纤维素酶主要 由霉菌产 照溶液代替粗酶液作为对照组， 生，因此筛选出高活性纤维素酶的 其余同试验。 菌株是开发利用纤维素资源，提高 1，5．2 CMC糖化力 (cx酶) 取 饲料营养价值的关键。笔者用马铃 0．5mL适当稀释的粗酶液，加入 薯葡萄~ (PDA)和察氏培养基 2mL1％羧甲基纤维素钠盐溶液 (CCM)从 自然界和饲料中分离出6 (CMC溶液)，50 水浴中反应3o 种8株纤维素酶产生菌，并进行了 rain，加入 2．5mL3，5一二硝基水 比较 。 杨酸试剂终止反应，煮沸5rain， 1 材料和方法 用 754型分光光度计于 530nm 1．1 待栓样品的采集和处理 从 波长下比色，由比色读数换算成 自然界中采集朽木、土壤、粪堆土、 葡萄糖毫克数，在此条件下每3o 草底土、发霉秸秆和霉变玉米等样 mill产生 1rag葡萄糖所需酶量定 品，分别放入三角瓶中，加入适量的 义为一个酶活力单位 (U)。酶活 生理盐水 ，室温浸泡 6h(每 2h振 力以u／g干曲表示。用对照溶液 荡一次)，作为待检样品。 代替粗酶液作为对照组，其余同 1．2 培养基 PDA和CCM，按常规方法配制。 试验。 1．3 霉茵的分离培养与鉴定 用接种环将待检 1．53 棉花糖化力 (Cl酶) 称取脱脂棉 50±1 样品分别划线接种于PDA和 CCM平板上，另外 rag于试管中，加入 1mL0．05mol／L、pm ．8的柠 将数个 PDA和 CCM平板敞口于实验室内2b；将 檬酸缓冲液和