纤维素酶生产菌株地的研究进展.pdfVIP

纤维素酶生产菌种的研究进展 作者：任竹梅 上海交通大学生命学院研究生 学号：5050809420 摘要 纤维素是自然界中最丰富的资源，因此工业上纤维素酶将纤维素资源转变为人类所需的 物质的运用就显得相当的重要。目前纤维素酶的生产主要是通过微生物发酵来进行的，这就 涉及到生产菌种的选择、如何提高菌种生产效率等问题。针对于此，本文介绍了目前常用的 一些生产纤维素酶的生产菌种及其研究发展现状，并对其研究趋势做出分析，旨在说明菌种 研究对于工业生产的重要意义。 关键词：纤维素酶 菌种 工业运用 纤维素是自然界含量最丰富的碳水化合物，占到了总生物量的 80 ％，因此在当今能源 和资源日趋危机的年代，借助于纤维素酶将纤维素资源转变为人类所需的物质显得尤为重 要，而对于纤维素酶的开发利用研究，也具有深远意义。纤维素酶是一类能够将纤维素降解 为葡萄糖的多组分酶系的总称，由 EG （内切葡聚糖酶）、CBH （外切葡聚糖酶）和CB （纤 维二糖酶或β-葡萄糖苷酶)构成。其降解过程是纤维素酶分子吸附到纤维素表面，然后，EG 在葡聚糖链的随机位点水解底物，产生寡聚糖；CBH 正是这些酶组分协同作用，最终将纤维 素水解为了葡萄糖。目前，纤维素酶广泛运用于酿酒、食品、饲料、造纸、制药、环保、石 油开采等工业，具有很大的市场需求量。 纤维素酶在自然界的分布很广泛，昆虫、软体动物、高等植物、细菌、放线菌和真菌都 能产生纤维素酶，甚至哺乳动物中的反刍动物的瘤胃及猪大肠中也有能够分解纤维素的细菌 存在。但是，植物中虽然广泛存在有纤维素酶，但从其中提取纤维素酶比较困难，而且含量 不高，所以目前研究运用比较少；而动物体内对于纤维素的消化主要是依靠其消化道内共生 的微生物、原生动物来完成，即使研究已经证明动物体内本身确实存在内源性的纤维素酶 [1]，但由于动物中相关研究的复杂性，成本和提取等方面的问题，动物中的纤维素酶的研 究运用也不多；所以，目前纤维素酶的运用还主要集中在微生物纤维素酶的运用上。 纤维素酶的产酶菌很多，主要有细菌、放线菌和丝状真菌。丝状真菌的纤维素酶产量较 高，可达 20g/L 以上，而且丝状真菌产酶具有诸多优点：产生的纤维素酶为胞外酶，便于酶 的分离和提取；产酶效率高，且产生的纤维素酶酶系结构较为合理；同时可产生许多半纤维 素酶、果胶酶、淀粉酶等。因此，目前丝状真菌所产的纤维素酶研究较多。而这其中活力较 强的菌种为木霉、曲霉、根霉、腐质酶和青霉等，腐质酶是中性纤维素酶的主要生产菌种[2]， 黑曲霉产生的纤维素酶可用于食品工业；青霉除了产生大量的纤维素酶外还可产生较高的葡 萄糖苷酶，从而弥补木霉产葡萄糖苷酶不足的缺点[3]。在工业生产中最著名的生产纤维素 酶的丝状真菌是 T.Reesei,其生产的纤维素酶具有酶谱全、活力高的特点。自 20 世纪 60 年 代以来，从野生菌株 T.Reesei QM6a出发进行了大量的筛选育种工作，其中 QM9414、RutC30 和 MCG77 能够生产活力较高、性状稳定、优质高产、抗代谢阻遏能力较强的内切型和外切型 葡聚糖酶[4]，是国内外生产酸性纤维素酶的主要菌种，也被认为是最具有工业运用价值的 菌株。 细菌纤维素酶产量较低，只有 0.1g/L 的含量，而且其所产纤维素酶主要为葡聚糖内切 酶，大多数对结晶纤维素没有降解活性，且所产生的酶是胞内酶或吸附在细胞壁上，不分泌 到培养液中，增加了提取纯化的难度，所以工业上很少采用细菌作为生产菌种。但是细菌产 生的纤维素酶除了传统的内切、外切纤维素酶外，还会分泌一种纤维小体到胞外，这种纤维 小体由多种纤维素酶和半纤维素酶组成，具有较高的水解纤维素的能力，在纤维素废弃物的 处理上具有很大的应用潜力[5]。 放线菌的纤维素酶产量也很低，因此在过去研究也较少。但是，丝状真菌产纤维素的菌 种集中在霉菌属，这类菌种的致病菌较多，其孢子易传播、感染，从而限制了其使用和开发。 特别是在纤维素酶运用最广泛的领域之一的食品工业中，若使用这类丝状真菌，则在产生纤 维素酶的同时，也会产生木霉素、T霉素和粘霉素等多种真菌毒素，威胁食品安全。因而， 在这类领域里，放线菌产纤维素酶的研究就显得相当重要。与细菌相比较，放线菌产生的纤 维素酶活力要更高一些；而且放线菌中致病菌极少，其生长过程中可以产生抗菌素，抑制食 品中杂菌的生长，从而延长其保质期，使其不易变质；同时，放线菌结构简单，为单细胞， 便于遗传分析。正是由于这些优势，放线菌产纤维素