唐山地区汉族人群IL6572CG与TNFα238AA基因多态性与脑梗死的关系.pdfVIP

型丕羞笠廑出丝匡迅墓厶登!坠堑=!!!￡』鱼塑型E：竖=!塑些垒基固垒奎丝皇堕撞殛的差丕筮丝塑 脑梗死的关系 刘东芳 张宝琴 张振宇 陈 晖赵亚婷 张成侠 陈乃耀1 王大力1 冯志刚 刘艳芬 訾建杰 (河北省唐山市人民医院血液科，河北 唐山063000) [摘要] [关键词]脑梗死；基因多态性；白介素_6；TNF—d [中图分类号】R743[文献标识码]A 近年来，脑梗死的发病率有逐年增高的趋势，且发病年龄 1．3 统计学方法采用SPSSl6．0统计学软件行，检验。 趋向年轻化，有研究认为是遗传因素和环境因素共同作用的结 果…。白介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)一仅是介导体内炎 2结果 症反应的重要因子，发挥重要的抗炎作用旧’；而IL-6和TNF—a 2．1 PCR及酶切产物电泳结果IL-6基因一572C／GPCR产 基因位点的多态性可能与脑梗死的发生有相关性。本文拟探 物长度为195 bp，目的条带单一清晰。扩增产物经特异性限制 讨唐山地区汉族人群中IL-6和TNF．a基因型的分布特点及其 性内切酶酶切后电泳结果表明：基因型有C／C型，C／G型和G／ 与脑梗死的相关性。 bp，扩 增产物经特异性限制性内切酶酶切后电泳结果表明：基因型有 1资料与方法 G／A型，G／G型和A／A型3种。 1．1 临床资料随机选取2010年1月至2012年1月我院收 2．2 治的唐山地区汉族脑梗死患者70例，男44例，女26例，平均年 梗死组IL-6—572C／G基因型分布频率和等位基因频率均与对 龄(47．33±8．5)岁；符合1995年中华医学会第四届脑血管病 照组有显著性差异(X2=5．31，P0．05)。见表l。 会议修订的各类脑血管疾病诊断标准，并经头颅CT检测确诊。 2．3 TNF．ot一238A／A基因位点多态性与脑梗死的相关性 排除外伤性、血液性、药物、肿瘤及脑血管畸形等引起的脑梗 脑梗死组TNF—d一238A／A基因型分布频率和等位基因频率均 死，患者无合并心、肝、肾等脏器疾病，无精神性疾病，意识清 与对照组有显著性差异(X2=4．88，P0．05)。见表2。 楚。另选取我院同期门诊体检的健康人群80例为对照组，男 56例，女24例；平均年龄(44．93±7．1)岁；两组一般资料比较 无统计学差异(P0．05)。 1．2 IL-6和TNF—ot基因型的检测抽取肘静脉血5IIll，加入 抗凝剂，加入氯仿及无水乙醇提取DNA，采用PCR和限制性片 段长度多态性分析IL-6—572C／G和TNF-0【一238A／A的基因 型，PCR扩增体系：DNA模板1山，TaqDNA聚合酶1一，MgCl2 2．5一，dNTPs2一，上、下游引物各1一，10倍缓冲液2．5一， 补DEPC水收至总体积25山。PCR反应程序：预变性94℃ 5min；变性：95℃35s，退火温度54℃，72℃35s，35个循环；延 表2两组TNF·仅基因型和等位基因频率的比较[／it(％)] 10 伸：75。C min。PCR产物的限制性酶切反应体系为：PCR扩 增产物10斗l，10倍缓冲液2出，限制性内切酶0．5山，补DEPC 收至总体积20出，混匀后置37。C水浴箱中消化过夜。PAGE凝 胶电泳检测：