利用DNA改组技术改造aacC1基因启动子活性地的研究.pdfVIP

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2015-08-06 发布于安徽
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利用DNA改组技术改造aacC1基因启动子活性地的研究.pdf

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卷期 !! 微生物学报 %’ (!! 0 ( 年月 #$$! # !#$ %’()(*(+$ ,-$ )*+,-.,/ #$$! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 利用!# 改组技术改造 $$ $% 基因启动子活性的研究， # # # # 沈国妙姚泉洪张铭彭日荷熊爱生（浙江大学生命科学学院杭州 4$$# ） # （上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院生物中心上海 #$$8 ）摘要：从表达质粒（登陆号：）中获得基因启动子，采用改组（） FGHI#E 3*?J.?K LG97$!8 !! M N0L N0L O@-PP’=?A 技术在体外获得突变体。以#!Q 作为报告基因，筛选获得活性明显改变的启动子。经过验证，对其中活性变化明显的个启动子用邻硝基苯基半乳糖苷（）作为底物进行表达活性测定。结果表明，获得的强启动子比原来 9 5! R0H3 的提高了倍，而弱启动子则活性下降明显，其中个几乎无活性。进一步对这个启动子进行了序列分析。 4 S 7 4 9 关键词：改组技术，基因启动子，突变 N0L !! M 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） T97 L $$$58#$1 #$$! $5$$E75$! N0L 改组是由UV**, 于 11! 年首次提出的， ()*L +,’L18 -.5 @OYW9 O-F;!! ,*’L）由上海农是一种基于HMW 突变的重组技术，可用于核酸、蛋业科学院生物中心构建并保存。［］白的体外快速进化。已利用该方法成功改造了一 %’ 主要试剂［］ # 系列蛋白质、酶、抗体和代谢途径等。但迄今为限制性内切酶、连接酶、、 6! N0L N0.O* # /!0 止，还没有该技术在启动子应用上的报道。、、购自日本 N0L H’/*,.O* NZ#$$$ [.K*, I5A.’ 6.\.5 基因编码庆大霉素氨基乙酰转移酶（公司；