壳聚糖／海藻酸盐微胶囊固定化酿酒酵母生产乙醇.pdfVIP

壳聚糖 ／海藻酸盐微胶囊 固定化酿酒酵母生产 乙醇 杨文娟 ，朱敏莉 ，齐智涛，刘博 ，薛伟 明 (西北大学化工学院，陕西 西安 ，710069) 摘 要 针对酿酒酵母细胞发酵生产 乙醇存在 的产物抑制 ，细胞利用率低 ，发酵效率低等主要 问题 ，以壳聚糖 、 海藻酸钠为微载体制备材料，采用脉冲 电场液滴工艺制备载细胞壳聚糖／海藻酸盐微胶囊，以细胞生长量和 乙醇 产量为检测指标 ，对微囊化酿酒酵母生长代谢特性进行研 究。结果表 明，微囊化酿酒酵母呈现 “s”型生长，生长 代谢规律与游离培养相似 ；经过批次培养 ，最大细胞生物量2．9Xl0 个 ／mL显著高于游离培养样 品 1．9X10 个 ／mL，乙醇产量 12．6g／L高于游离培养工艺产量 10．2g／L。正交设计试验表 明，壳聚糖分子量是影 响微囊化 细胞 乙醇产量的显著 因素，优化条件组合为壳聚糖分子量5万、壳聚糖浓度2．0mg／mL、成膜反应 时间15min及 培养基 pH6．0，在此条件下获得 乙醇产量为 13．5g／L。 关键词 壳聚糖 ，海 藻酸盐 ，微胶囊 ，酿酒酵母 ，乙醇 酒精是重要 的工业原料 ，在食 品、化工 、橡胶、油 胞提供了相对稳定的生长微环境 。在浓度梯度推动 漆涂料 、电子、造纸 、香料与化妆品等工业行业应用广 下 ，一方面 ，培养基 中营养底物通过微囊膜 中微孔 向 泛…。酒精生产方法主要有两类 ：微生物发酵法和 囊内传递 ，为细胞生长提供营养 ；另一方面，囊 内细胞 化学合成法 ，其 中，采用酿酒酵母发酵生产酒精是 产生的小分子代谢产物也可 以通过囊膜不断 向外环 相对经济的方法。 由于酒精是酵母细胞 的强毒性代 境扩散，有效减轻 了产物积 累对细胞生长代谢 的抑 谢物 ，发酵液中酒精产物累积将严重抑制酵母细胞 的 制 。 生长代谢 ，进而 限制酒精产量的提高 。 ，因此如何 本文以天然多糖海藻酸钠 、壳聚糖为微胶囊制备 使酿酒酵母在发酵过程中保持较高生长速率、提高酒 材料 ，以酿酒酵母为细胞模型 ，制备包封酿酒酵母的 精产量 ，是众多企业与学者研究的重要课题 。 壳聚糖 ／海藻酸盐微囊化体 系，研究期望在于减轻细 酵母细胞 固定化生产 乙醇 可 以解决传统游 胞发酵过程 中的产物抑制，提高微囊化细胞 的稳定 离发酵工艺 中机械搅拌对 细胞损伤 、细胞利 用率低 、 性 ，提高发酵效率 ，为微囊化酿酒酵母 的工业应用提 产物抑制 明显 、生产 能力低等 问题 。实现细胞 供理论依据 。 固定化 的技 术 主要 包括 吸 附、共 价交 联 、凝胶 包埋 等。 ，但它们的主要问题在于：(1)固定化载体尺寸 1 材料与方法 过大 (通常大于 3mm)，难 以在发酵容器 中稳定悬浮 ， 1．1 菌种 营养物和代谓f产物传质效率低 ；(2)吸附或包埋工艺 酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)B184，购 自 制备 的固定化细胞 ，细胞包封率低且易脱落 ，而共价 陕西省微生物研究所菌种保藏中心。 交联技术易导致细胞损 伤 问题 。本文拟采 用脉冲 电 1．2 原料和试剂 场液滴工艺制备载细胞微胶囊 ，工艺特点为制备条件 海藻酸钠 (化学纯 ，西安化学试剂采购站)；壳聚 温和、工艺简便 、固定化细胞活性与包封率高 、微米尺