液相色谱电化学检测器测定猪肝中残留盐酸克伦特罗.pdfVIP

广西师范大学学报 〔自然科学版) 2003年10月 JOURNALOFGUANGXINORMALUNIVERSITY Vol.21 No 液相色谱电化学检测器测定猪肝中残 留的盐酸克伦特罗 张雪竹 ，甘一如 ，赵福年 (天津大学 化工学院生物工程系，天津 300072) 盐酸克伦特罗是一种平喘药.由于其可促进动物肌肉生长，减少脂肪沉积川，而在动物饲料中被滥用. 动物组织中残留的克伦特罗会对消费者造成危害川，但 目前仍缺少简便、灵敏的方法来检测它.常用的几 种用于分析生物样品中盐酸克伦特罗的方法是薄层色谱法[37、液相色谱法U[1、气质联用法[a7酶联免疫 法[s1等.由于盐酸克伦特罗分子的苯环上连有氨基基团，有电化学活性，所以本实验选用电化学检测器对 其检测. 实验中分别采用不同pH值的流动相A，考察pH对盐酸克伦特罗保留因子、峰高的影响，结果见图1 一2.由图可知，盐酸克伦特罗的logk值随pH的增加而增加.而当流动相A的pH为4.。时，其峰高响应 最大.为增加整个系统的敏感性，选择pH4.。为宜. 还考察了盐酸克伦特罗在多孔石墨电极上的电化学行为，记录不同电势下的电流响应，做电势 电流 图，见图3.由电势 电流图选择信噪比大处的电势为检测电势，即450mV,600mV,650mV和680mV. 盐酸克伦特罗在600mv,650mV和680mV可达到完全氧化.450mV作为杂质的滤除电势，可去除和 盐酸克伦特罗保留时间相同而电化学性质有所不同的干扰物质. 此外，还考察了提取pH对提取回收率的影响.结果样品的pH为11.6士。.2时，提取回收率最高，为 7800. 综上所述，最佳提取及HPLC条件为:将含有盐酸克伦特罗的猪肝用匀浆机匀浆，用1mot·L’盐酸 溶出其中的盐酸克伦特罗，再用乙醚去除盐酸溶出液中的脂肪后，用2mot-I一，氢氧化钠调节溶出液pH 为 11.6，用乙醚萃取其中的克伦特罗.残渣用 1m[流动相溶解，HPLC检测.液相色谱的流动相A为 50mmolI’磷酸一30mmo卜工一’三乙胺，并用2mot·工一氢‘氧化钠调pH至4.0;流动相B为甲醇: 乙睛=30:45(V/V);流动相组成为A:B=80:20.四组电极的检测电势分别为450mV,600mV, 650mV和680mV.在此条件下，猪肝中盐酸克伦特罗的萃取回收率为78写;检测限为1.2ngg`.样品 色谱图见图4^-5. 本研究开发的用于猪肝中盐酸克伦特罗检测的方法精密、灵敏，准确性好.适用于生物样品中盐酸克 伦特罗的监测. 参 考 文 献 川 GinkelI.A va- StephanyRW .Roseum HJ.etal.JAssOffAnalChem lot门992.76:554-560 叫 SallerasL.DonguezA,MataE.etal.PublicHealthRep.1995,110:338--344. 川 HeniooJ.May]inGA.ThomsonBA.JChromatogr.1983.271:107-112. 川 BlanchflowerW J,HewittSA,CannavanA,etal.BiolMassSpectrom.1993,22:326-333 圈 YamamotoI,Iwalak3.Immunoassay,1982.3- 15 作者简介:甘一如(1958-)，男，教授.研究方向:生物制药与药物分析.E-mail:yirugan@sina 第 21卷 广西师范大学学报(自然科学版) 109 12 1200 1400