磁珠法-真假羊肉鉴定.ppt

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量程的调节方法 zjd6650@ / 移液枪的使用 吸取液体 释放液体 1档 2档 zjd6650@ / 1、裂解细胞 每小组领取称好的肉制品( A 、B、C或D ),用镊子将肉放在研钵中稍加研磨 加入10μl 蛋白酶K继续研磨至匀浆状,加入200μl裂解液 用移液枪转移到2.0ml EP管中1中,振荡至彻底混匀 将小指管标号为1、2、3、4、5 将EP管1置于56oC恒温水浴锅中保温约15分钟 在研钵的一角进行充分研磨 zjd6650@ / 保温同时,讲解下面内容: 思考: (1)恒温水浴锅的温度若过高或较低,对裂解细胞可能有什么影响? (2)温育后,小指管中可能会有哪些物质? 蛋白质、脂肪、糖类、DNA、无机盐等 zjd6650@ / 盒子里既有铁钉,又有许多铜钉和木钉,你怎么把铁钉挑出来? zjd6650@ / 磁珠 生物活性基团 磁珠可特异性地结合DNA zjd6650@ / 2、磁珠结合 注意:磁珠结合液使用前必须上下颠倒、充分混匀,否则可能使提取的DNA量下降。 1号 混匀的磁珠结合液250μl 颠倒混匀5分钟 DNA、蛋白质、脂质、糖类等的混合物 zjd6650@ / 裂解 洗Ⅰ 500μl 洗涤液Ⅰ 磁珠与DNA结合 3、洗涤 洗Ⅱ 500μl 洗涤液Ⅱ 将磁珠吸附于磁力笔上,于空气中静置1 min 加磁场,吸起磁

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