吡咯喹啉醌对雪旺细胞增殖及NFκB表达的影响.docVIP

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吡咯喹啉醌对雪旺细胞增殖及NFκB表达的影响.doc

吡咯喹啉醌对雪旺细胞增殖及NF-κB表达的影响 吡咯喹啉醌对雪旺细胞增殖及NF-ΚB表达的影响 作者:贺斌 刘世清 李皓桓 作者单位:武汉大学人民医院骨科,武汉 430060  基金项目:国家自然科学基金资助项目(No30570496);武汉青年科技晨光计划资助项目资助(编号:200750731256) 【摘要】 [目的]观察吡咯喹啉醌对雪旺细胞的增殖作用及其对体外培养雪旺细胞NF-ΚB表达的影响。[方法]新生鼠雪旺细胞体外原代培养及纯化,S-100免疫荧光标记鉴定雪旺细胞,设实验组与对照组,实验组吡咯喹啉醌的浓度为100 nmol/L;加药72 h后提取总mRNA及总蛋白进行RT-PCR和Western blot分析。[结果]采用RT-PCR和Western blot检测NF-ΚB的表达,结果均表明实验组表达较对照组高(P0.05)。[结论]吡咯喹啉醌可促进雪旺细胞增殖,NF-ΚB上调在吡咯喹啉醌促雪旺细胞增殖中起作用。 【关键词】 吡咯喹啉醌 雪旺细胞 增殖 NF-ΚB   Effects of pyrroloquinoline quinone on proliferation and expression of NF-ΚB in cultured Schwann cells   HE Bin, LIU Shi-qing, LI Hao-huan.   Department of Orthopedics, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, China Abstract: [Objective]To investigate the effects of pyrroloquinoline quinine (PQQ) on proliferation and expression of NF-ΚB of Schwann cells. [Methods]Schwann cells were cultured from sciatic nerves of SD rats in vitro. The Schwann cells were identified and purified by immunofluorescence of S-100 and Ara-C. Experimental group with was 100 nmol/L of PQQ and control group were set up.The expression of NF-ΚB in Schwann cells was determined by RT-PCR and Western blotting.[Results]The expression of NF-ΚB were up-ragulated by PQQ in cultured Schwann cells (P0.05).[Conclusion]PQQ could promote the proliferation of Schwann cells and up-regulation of NF-rd3 play an important role in this process.   Key words:pyrroloquinoline quinone; Schwann cell; proliferation; NF-ΚB 雪旺细胞(schwann cells,SCs)是周围神经系统的主要胶质细胞,在周围神经损伤、再生和修复过程中发挥重要作用[1]。目前神经再生工程研究飞速发展,SCs作为该领域的种子细胞日益为研究者所重视[2、3]。SCs体外增殖速度缓慢,体外短时间内扩增大量高纯度SCs是神经再生组织工程领域研究的热点。吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)是一种不依赖于NAD(P)和FAD的葡萄糖脱氢酶辅基,在生物体内可发挥多种生物学效应,能促进动物的生长发育,细胞的增殖,保护神经细胞并促进其神经生长因子的分泌[4]。先前已有学者将PQQ作用于损伤的周围神经,发现它可以促进周围神经修复及再生[5~7];而且发现PQQ可以促进SCs分泌生长因子[8、9];得到了PQQ促进体外培养SCs增殖的最佳作用浓度和最佳作用时间[10]。本实验旨在研究PQQ促进体外培养SCs的增殖并观察其对体外培养SCs的NF-ΚB表达的影响,进一步探讨PQQ促进SCs增殖效应并揭示其可能的机制。 1 材料与方法   1.1 材料   出生3

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