猪牛沼液施用对士壤细菌多样性的季节性影响.pdfVIP

2潮?簟舞40卷是24期 {-co—F8№*鹎，蒲救篷燕 猪牛沼液施用对士壤细菌多样性的 季节性影响 章杰1,2，文勇立”，王永1，马力。，陈世忠3、廖远勤3 (1．西南民族大学生命科学与技术学院，四川成都610041： 2．四川农业大学动物科技学院，四川雅安625014；3．双流县农村发展局，四川成都610200) 摘要：采用PCR—RFLP法分析了灌溉猪沼液、牛沼液和施用化肥的土壤细菌多样性的季节性变化．通过直接提 取土壤DNA，扩增细菌16SrDNA基因片段，建立克隆文库，用限制性内切酶A丘I和HindⅢ进行酶切，得到了 96～123种酶切类型。采用多样性驯度对试验结果进行统计分析。结果表明，细菌多样·t生-ll数H’、D，…Dd㈣R扫 E变化规律为：施用猪沼液处理组施用牛沼液处理组对照组(PO 05)，Simpson指数x则表现为对照组牛沼 液组猪沼液组(P005)，细茵群落的均匀度指数J。和种问相遇机率的PIE指数均为猪沼液组牛沼液组)对照 65％～18 组(P0．05)；细茵多样性指数H’、d№、R和k的变异系数在287％之间，尤以Simpson指教x变化最为 敏感，处理问差异最大。最终得到如下鲒砖：处理以厦季节对细菌多样性的影响极显著，不同处理土壤细茵多样 性为猪沼液组牛沼液蛆)对照组，春季细菌多样性高于秋季：实施种养结合循环利用模式3年后，土壤细菌多样 性有不同程度的提高． 关键词：沼液；季节；16SrDNA；PCR—RFLP；细菌多样性 5 中圉分类号：S1543；$811 文献标识码：A 土壤微生物群落是土壤巾的活性组分|lI，几乎 法只能培养出占总种群数0川％～10％的微牛物量， 都直接或间接地参与到土壤，#物地化循环中．如养 因此结果的代表性较有限，而用分子牛物学方法研 分运转、有机质分解、土壤结构维持和上壤污染物净 究微生物群落结构可大大提高研究效率和结果的准 化等。响报道指出，有机农业耕作条件F，土壤具有 确度I…。由于不同畜种沼液的理化性状簋异很大，其 较高的微生物群落多样性p”。涮液是有机物厌氧发 对土壤微生物群落的影响也存在差异；季节的更替 酵后的残余物，是一种优质的肥料。Maderl4I等研究直接导致温度和水分的变化，进而影响微生物的多 r施用沼液后的土壤理化特征；也有研究者应用 样性和活性…。地处川西平原的双流县长期实施种 养结合模式，本文以此作为研究对象，以灌溉沼液的 Biolog法研究了沼液土壤微生物多样性H，但传统方 基金项目：阴川省应用基础研究项目(YYJC2010—012)；西南民臌养殖场耕地土壤为材料，以施用化肥的土壤作对照， 大学博士基金项H(tSJJ一006) 采用PCR—RFI．P法分析r不同季节不同畜种沼液施 作者简介：章杰(1985)．男．四川雅安^。硕士研究生，主要从 用对上壤微生物多样性的影响，以期揭示该模式的 事土壤生态学研究 +通讯作者 生态和环境效益。 中固螽牧东患《》 毒牧生态-Eco—Farming 2012年第48卷第24期 000 离心3rain，吸取上清异丙醇沉淀1h，12 r／min离 1自然环境概况 心5rain；70％乙醇清洗2次