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报告内容： 研究背景 结果与分析 讨论 研究背景 (一)相关概念 顺式作用元件(cis-actingelement)：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。（如ESS） 反式作用因子(trans-acting factor) :是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。（本研究中的hnRNPL,hnRNPE2和PTB都是结合在ESS1上的反式作用因子。） 外显子剪接沉默子(ESS) ：是一种顺式作用元件，处于外显子4上，决定这个外显子的表达与否，从而造成mRNA前体的不同剪接方式。 ΔE3 、ΔE7、ΔE3E7、Δ5、ΔBPS等：都是外显子上一些突变的位点。 (二)剪接机制 剪接体(spliceosome) ：是指进行hnRNA剪接时形成的多组分复合物, 主要是由小分子的核RNA和蛋白质组成的复合物（即snRNP ）。其中，U1、 U2、U4、U5和U6 snRNP参与hnRNA的剪接过程。 RNA的剪接作用：mRNA剪接是在剪接体上进行的。在转录时，外显子和内含子均转录到同一hnRNA中，转录后通过剪接把hnRNA中的内含子除去，把外显子连接起来，这就是RNA的剪接作用(splicing)。 1.ESS1?以非常规的方式抑制剪切体的装配 4.ESS1抑制外显子的剪接需要AEC 5.hnRNP?L是形成AEC及抑制剪接体装配的决定性因素 选择性剪接： 三、讨论 1、剪接体装配过程中，在形成复合体C之前经过3个中间（E-A-B）复合体 。ESS1抑制剪接体装配的实质是ESS1上的反式作用因子（hnRNPL, hnRNPE2 等）抑制CD45基因上外显子4的剪接装配是在形成ATP、U1和U2snRNP依赖型的复合体A之后而未形成B复合体之前的这个阶段起作用的。但是，ESS1抑制功能的发挥与外显子4结构的完整性相关，在其5或 3端进行突变都会使得ESS1丧失抑制功能。 2、在ESS1没有功能的前提下，U1和U2snRNP结合到外显子的两侧的剪接位点上形成复合体A，随后U4、U5、U6snRNP被招募到每个内含子上形成成熟的复合体C,最终将内含子剪切，使三个外显子连接起来。 但是在ESS1有功能时，hnRNP（包括hnRNPL,hnRNPE2等）连接到ESS1上，与U1、U2snRNP作用形成一个三元复合体，B复合物不能在这形成，因此外显子3和7的3和5端的U1、U2 snRNPs相互作用形成复合体C，从而剪切了包含ESS1的外显子4及其两侧的内含子，最终产物只有外显子3和外显子7连接成成熟的mRNA. * * 依赖ATP的外显子识别之后外显子剪接沉默子抑制剪接体的装配 林少芸 刘红芳 谢梦甜 周 迪 杨静秋 王金 万远 RNA的剪接过程 1.ESS1?以非常规的方式抑制剪切体的装配 3.ESS1使A复合物停滞而形成AEC复合物 4.ESS1抑制外显子的剪接需要AEC 5.hnRNP?L是形成AEC及抑制剪接体装配的决定性因素 结果与分析： 2.A复合物形成的相关因子  2.A复合体形成的相关因子 3.ESS1使A复合物停滞而形成AEC复合物