T-RFLP法与研究金霉素对肉鸡回肠微生物群落多样性及影响.pdfVIP

183 饲料营养与畜禽健康专题 o T010079 T-RFLP法研究金霉素对肉鸡回肠微生物群落多样性的影响 张华 刘国华蔡辉益 郑爱娟 常文环 张姝 00081) (中国农业科学院饲料研究所，北京1 引言 饲用抗生素的促生长作用机理一直足饲料科学领域的研究热点之一。但由于研究方法的局限，先前 的研究一般都以培养计数作为观测手段，而忽视了更加庞杂的小可培养微生物。末端限制性片段长度多 态性(T-RFLP)作为一种基于16SrDNA的微牛物快速分析技术，具有不依赖丁培养、高通量、高分 辨率的特点，特别适合研究复杂群落的动态变化。本试验采用T．RFLP技术探讨金霉素对肉鸡【丌J肠微生 物群落多样性的影响，为揭示抗生素的促争长机理提供试验慕础。 材料方法 rDNA，【口I收 mg／kg)的试验口粮。28}I龄时无菌采取鸡川肠末端内容物，提取细菌DNA，扩增16S PCR产物进行限制性内切酶酶切，毛细管电泳检测酶切片段获得T．RFLP|{}|谱。 结果 添加金霉素显著影响肉鸡[口l肠微牛物多样性，其种群的丰富度和稳定性随着Lj粮中金霉素添加砖的 提高而逐渐升高。金霉素显著削弱了微生物种群中的优势菌种的增殖，随着添加最的提高其优势越来越 讨论 本研究证实了佟建明等…关于金霉素抑制大肠杆菌增魑的报道，同时还发现金霉素对肠球菌、发光菌 属以及一些不可培养微生物都具有抑制作用。一般认为，金霉素能促进有益微生物如乳酸杆菌的增殖12l， 但徐丽萍等【3J发现金霉素对乳酸杆菌的繁殖具有抑制作用。本试验则发现，金霉素对人部分可培养乳睃杆 菌有抑制作用，但对不可培养乳酸杆菌具有明显的促进作用。试验还发现，T．RF596片段仅}}{现于对照组， 而PRP95片段则仅出现于金霉素组，表明这两个片段有可能作为检测饲料中是否添加金霉素的定性指标。 参考文献 【l】佟建明，萨仁娜．持续、低剂茸金霉素对肉仔鸩肠道微生物、血氨、尿酸和生产性能的影响[J】．畜牧兽医学报，200l，32 (5)：403～409． 【2】马玉龙，许梓荣．金霉素对肉鸡生长、肠道荫群和细菌酶、肠组织形态的影响【J】．浙江大学学报，2005，31(4)：507 512． 【3】徐丽萍，李静姬，娄玉杰．金霉素对肉鸡生产性能及肠道微生物影响的研究【J1．当代茵牧，2003，8：34～37．