利用基因组差异显示技术与研究高温对动物肠黏膜免疫及影响.pdfVIP

特邀专题报告 0143 ZT05005 利用基因组差异显示技术研究高温对动物肠黏膜免疫的影响 刘凤华 (北京农学院动物科技系，北京102206) 夏季高温高湿天气易诱发猪热应激，导致猪生产性能下降，给养猪业带来巨大经济损失。肠道不仅 是机体消化吸收的重要场所，同时也是机体的重要免疫器官，也是机体内最人的细菌和内毒素库，因此 应激过程中，肠道成为了“应激反应的中心器官”和“多脏器功能衰竭的始动器官”，机体95％以一卜的 感染发生在黏膜或由黏膜入侵机体，因此黏膜免疫已经成为当前免疫学领域的研究热点，尤其是肠道黏 膜免疫越来越被人们重视。 小肠黏膜免疫与组织细胞的基因表达密切相关，然而参与黏膜免疫调控的基因数目之多、调控关系 之复杂使传统分子生物学方法显得力不从心。基于Southernblot发展起来的基因：醛片也称为基凶微列阵 (cDNA microarray)，应用已经破解的动物全基因组已知核酸序列作为探针与互补的靶核苷酸序列杂 交，使得合成、固定高密度的数以万计的探针分子以及对杂交信u．进行实时、灵敏、准确的检测分析变 得切实可行。本文在猪和大鼠热应激模型基础上，研究热应激对肠道结构及肠黏膜免疫的影响：利用 Agilent基因芯片技术平台榆测热应激后大鼠小肠基因表达谱变化，筛选小肠黏膜免疫相关的差异基闪， 并根据Genebank和KEGG数据库完成表达差异基闪的EST，Gene 鼠热应激模型成功复制的基础上，利用基囚芯片全面揭示热应激人鼠肠道基凶表达变化，从而探索热应 激状态F的肠道黏膜免疫相关基因的表达，筛选出小肠黏膜免疫的相关因子。为从基闪水平上进一步研 究人鼠小肠黏膜免疫机理寻找线索。研究表明： 1．热应激导致猪和大鼠体表温度，直肠温度及血清皮质醇均显著升高(火O．05)，同时导致小肠黏 膜损伤，上皮脱落，固有层裸露，以十-指肠和空肠损伤最为严重。 2．热应激抑制了T淋巴细胞亚群的增殖与分化而使肠黏膜相关淋巴组织细胞免疫功能降低，通过 性分析表明猪和人鼠热应激模型在生理指标、小肠黏膜损伤和黏膜免疫指标表达等诸多方向的变化相 似，具有良好的一致性和相关性，可以用模式生物大鼠代替本动物猪进一步开展高温应激对黏膜免疫影 响机制研究。 3．热应激导致大鼠小肠黏膜严重损伤，并改变其基因表达谱。根据Genebank和KEGG数据库完 成表达差异基因的EsTGene 出290个．卜调基因，132个下调基因，主要涉及免疫、应激反应、物质合成代谢相关的差异基因等；筛选 出多条信号调节通路，发现热应激相关通路主要涉及生物合成、新陈代谢、免疫调节等。与免疫相关基 和TLR4反应了机体的肠黏膜免疫水平，是细菌及其脂多糖(LPS)的直接作用受体，细菌通过与TLR的结 B促使细胞内反映，释放相应细胞因子。关于热应激对TLR 合作用将其刺激信号传到下游信号直至NF—K 表达的影响鲜有报道，因此本文首次通过芯片分析表明热应激对肠道黏膜免疫机制的影响是通过肠道免 疫相关基因的变化来共同影响机体免疫水平的。 ‘作者Email：Liufenghual209@126．com。