十八碳脂肪酸对泌乳奶牛乳腺上皮细胞增殖甘油三酯合成及影响.pdfVIP

240蟋》2011年学术年会 T010091 十八碳脂肪酸对泌乳奶牛乳腺上皮细胞增殖及甘油三酯合成的影响 崔瑞莲王加启 卜登攀魏宏阳 南雪梅胡 菡 周凌云 00193) (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室，北京1 引言／目的 在泌乳期，乳腺能利用长链脂肪酸合成片油三酯，并最终分泌到乳中；同时，奶牛的泌乳量和乳成 分与奶牛乳腺上皮细胞的数量和功能有很大的关系。因此，本研究旨在探讨外源添加十八碳脂肪酸对泌 乳奶牛乳腺上皮细胞增殖及甘油三酯合成的影响。 方法 试验以泌乳奶牛乳腺卜皮细胞为模型，其培养过程参照Hu等(2009)报道。泌乳奶牛乳腺．卜皮细 胞经复苏传代后，采用诱导培养基(DMEM／F12中添)3111 g／LBSA、5mg／L催乳素、5mg／mL胰岛素，5 mg／mL转铁蛋白，5mg／mL孕酮，10一mol／L氢化可的松，10ng／mL牛表皮生长因子、5mg／mL雌激素)培养， 细胞中分别添)3110、0．78、1．56、3．125、6．25、12．5、25、50、100、200、400 I．tmol／L的十八碳脂肪酸(分 别为硬脂酸、油酸、亚油酸及亚麻酸)作用24h后，采用MTT法检测细胞生长情况，以确定细胞对各脂 h后， 肪酸的最高耐受剂最；在细胞耐受范围内，分别添加不同浓度梯度的四种十八碳脂肪酸，培养24 采用}j‘油三酯检测试剂盒测定培养液中甘‘油三酯的含量。试验中各处理设置3个重复，每个试验独立重 复3次，数据采用SAS9．0软件ANOVA程序进行单因素方差分析。 结果 与对照相比，200、400 lamoi／L的硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸均能显著或极显著减少活细胞数 并抑制细胞的生长(Po．05或P0．01)，因此设定100lamol／L作为各脂肪酸的最高添加荆董；分别添 加0、25、50、100 h后检测培养液中甘油三酯含量，结果显示，四 lamol／L的四种十八碳脂肪酸培养24 lamol／L的添加范围内，培养基中甘油三酯的含量与各十八碳脂肪酸添加量呈正相关。 讨论 体外培养的乳腺上皮细胞的生长、增殖、分化、生理功能等，同乳腺的发育一样，受激素、生长因 子、营养素等的影响，长链脂肪酸是奶牛重要营养物质之一，但高剂量的添仍会对乳腺上皮细胞的生长 增殖及存活产生一定的抑制作用；在长链脂肪酸的合理添加范围内，乳腺L皮细胞甘油三酯的合成与脂 肪酸添加剂量呈正相关，可能是因为激活了长链脂肪酸的外源摄取及廿油三酯的合成途径，从而最终导 致乳腺上皮细胞甘油三酯合成增多。 参考文献(略)