磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定.docVIP

磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定 [目的] 1.了解磺胺类药物(sulfonamides)在动物体内随时间变化的代谢规律。 2.掌握药代动力学参数的测定及计算方法。 3.了解药代动力学参数的测定及计算的临床意义。 [原理] 血浆半衰期是指血浆药物浓度下降一半所要的时间。临床上常用药物多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，也就是血中药物消除速率与瞬时药物浓度成正比，根据这一规律可知：药物静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。 该直线的方程式为： ① 药物血浆浓度半衰期（t1/2）为： ② 因此，我们只要求出药物的消除速率常数Ke，就可以得出药物的血浆半衰期。由公式（1）可推出 ③，只要我们测出两个时间的血浆药物浓度，又知道这两个浓度变化的时间间隔，就可以求出Ke，进一步算出血浆半衰期。那么我们怎样才能测出任意时间的血药浓度呢？为解决这个问题，我们首先学习下面这个问题。 显色原理： 磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类化合物（-NH3+），进而与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐（-N=N+-）。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其光密度，通过与标准品光密度的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下： [材料] 器材：72型分光光度计、离心机、兔手术台、手术器械一套、动脉夹、动脉插管、磅称一台、1ml注射器三支和5ml一支、lml和10ml吸管各一支、2ml吸管5支、吸球一个、离心试管、试管架。 药品：20％磺胺嘧啶钠溶液（sodium sulfadiazine,NaSD）、10％肝素钠溶液、0.02％磺胺嘧啶钠标准液、7.5％三氯醋酸溶液、0.5％亚硝酸钠溶液、0.5％麝香草酚溶液（用20％NaOH配制）、20％NaOH溶液、20％乌拉坦溶液（Urethane）、蒸馏水。 动物：家兔，体重2kg左右。 [方法] 血药浓度的测定： 麻醉：取家兔一只（实验前禁食12小时,不禁水），称重，用20％乌拉坦5ml／kg行静脉麻醉，然后固定于手术台上。 手术：可选用颈总动脉（或股动脉）。手术区剪毛，沿正中线切开颈部皮肤，切口约6cm左右，钝性分离皮下组织和肌肉，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根，一根结扎远心端，一根备用。耳缘静脉注射肝素2ml。 插管：用动脉夹夹住动脉近心端，在于两线中间的动脉上剪一“V”形切口，插入动脉插管，用备用线结扎牢固以备取血用。 打开动脉夹放取空白血样2ml置于预先用1％肝素（或0.1ml肝素稀释10倍）浸过的离心试管中，摇匀标记待用。然后由耳缘静脉注射20％的磺胺嘧啶钠2ml／kg，于给药后15分钟及 45分钟各由动脉抽血2ml，分别置于同上试管中，摇匀待用。 用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，立即置于盛有7.5％三氯醋酸（提供酸性条件并可沉淀血中蛋白质）5.8ml的试管中充分摇匀，然后以 1500转／分的转速离心5分钟待用。 标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠0.2ml，加入到7.5％三氯醋酸5．8ml中，摇匀待用（标准管磺胺浓度200mg/L）。 各比色管的配制（见下表） 成分 空白管（ml） 标准管（ml） 测定管（ml） 给药前 给药后15min 给药后45min 测定液 / / 1.5 1.5 1.5 标准液 / 1.5 / / / 蒸馏水 1.5 / / / / 0.5％NaNO2 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5％麝香草酚 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 完成以上配制操作后，用7230型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并按以上公式计算t1/2。 药代动力学参数计算：按下列公式计算出各药代动力学参数 （1）消除速率常数： （min－1） （2）消除半衰期：t1/2=0.693/Ke （min） （3）表观分布容积：Vd=D/C0 （D=400mg／kg×xxkg） (L) （4）血浆清除率：CL=Ke·Vd （L/min） ［思考题］ 1．测定半衰期有何意义？ 2．根据Vd=D／Co，当用药剂量400mg／kg（D）你能计算出零时药浓Co及表现分布容积Vd吗？ ［注意事项］ 1.动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素2ml。 2.取血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残血放掉。 3.每吸取一个血样时，必须更换注射器；加样时注射器头不要碰到三氯醋酸液面。 4.将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则