BALB／c小鼠1型糖尿病模型的构建与CD4^＋CD25^＋Treg的检测.pdfVIP

广东医学 2011年2月 第32卷第 4期 GuangdongMedicalJournalFeb．2011．Vo1．32，No．4 · 427 · BALB／c小 鼠1型糖尿病模型的构建与 CD4+CD25+Treg的检测 刘繁荣 ，钟清玲 ，刘德伍 ，彭燕。，赵彤 南昌大学 医学院病理教研室，研究生学院 (南昌330006)3南昌大学第一附属医院烧伤研究所 (南昌330006)； 南方医科大学基础医学院病理学系(广州 510515) 【摘要】 目的 探讨链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导 BALB／c小鼠1型糖尿病模型的方法，检测糖尿病 模型中CD4 CD25 调节性 T细胞(regulatoryTcell，Treg)的变化及意义。方法 将 60只雄性 BALB／c小鼠随机 分为A、B、c、D4组，每组 15只，A组采用一次性腹腔注射 150mg／kgSTZ，B组采用一次性腹腔注射与 A组等量 无菌柠檬酸缓冲液，c组采用200mg／kgSTZ分 5次腹腔注射 ，D组采用与 c组等量无菌柠檬酸缓冲液分 5次腹 腔注射 ，监测不 同时点空腹血糖变化 ，A、B、c、D4组均 自由饮食 。用流式细胞术检测成模前后外周血 Treg细胞 数的变化。结果 A组糖尿病成模率为 86．67％，血糖在 3周后稳定在较高水平且无明显下降；C组糖尿病成模 率为93．33％，血糖的动态变化与A组相似 ；两组糖尿病成模率相比差异无统计学意义(P0．05)；B、D组无糖尿 病成模；非成模组与成模组外周血 CIM CD25Treg分别为(4．05±0．37)％和 (8．68±0．45)％，差异有统计学意 义(P0．05)。结论 采用一次性腹腔注射 STZ是构建 BALB／c小 鼠 1型糖尿病模型较 为理想的方法。外周血 CIM CD25Treg的比例可作为 l型糖尿病模型构建成功的参考指标。 【关键词】 BALB／c小鼠；链脲佐菌素；糖尿病 ；调节性T细胞 Establishmentoftype1diabeticBALB／cmousemodelsanddetectionofCD4 CD25 regulatoryT cells． L／U Fan～rong ，ZHONGQing～ling，LIUDe—wu，PENGYah，ZHAOTong． DepartmentofPathology，MedicalCollege ofNanchangUniversityNanchang330006，China A【bstract】 Objective Toestablishtype1diabeticBALB／cmousemodelsandinvestigatethesignificanceof CD4 CD25 regulatoryTcells(Treg)inT1DM．Methods SixtyBALB／cmicewererandomlydividedintofourgroups (n=15)．BALB／cmousediabeticmodelswereestablishedwithsingleintraperitoenal(ip)injectionof150mg／kgof streptozotocin (STZ)and5separatedipi．jectionof40mg／kgofSTZinGroupAandGroupC，respectively，whilecon— troisweresetupwithcorrespondinginjeetionsofcitratebuffersolutioninGroupBandGroupD，respectively．Bloodsugar levelwasmeasured．TherfequencyofCD4 CD25 Tregcellsinperipheralbloodwasdeterminedbyflow cytometry．Re- suits Type1diabetesmellitus(T1DM)wasobservedin86．67％ and93．33％ miceofGroupAandGroupC，respec— tively．withsuspendedhighbloodglucosesincethe21thday．NosignificantdifferencewasrevealedbetweenGroupAand C (P0．05)．ThepefipheralCD4 CD25 Tregcellproportiofiwassignifieandylowerinmodelgroupsthanth