mPEG-PCL-g-PEI聚合物纳米粒介导的小干扰RNA递送.pdfVIP

·344 · 药学学报 ActaPharmaceuticaSinica2011，46(3)：344—349 mPEG—PCL—g—PEI聚合物纳米粒介导的小干扰 RNA递送 黄 伟 ，吕 明2，高钟镐 ，金明姬 ，杨长青2 (1．中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所，北京 100050； 2．延边大学药学院，吉林 延吉 133000) 摘要：本文 旨在合成小干扰核糖核酸 (siRNA)递送载体聚合物聚乙二醇 聚 己内酯一聚乙烯亚胺 (mPEG—PCL．g．PEI)，并探讨其体外 siRNA 递送性能。通过开环聚合反应制备二嵌段共聚物聚乙二醇 聚己内酯 (mPEG．PCL—OH)，将 mPEG．PCL—OH 的羟基末端依次化学转化为羧基 (一COOH)和 AL羟基琥珀酰亚胺 (-NHS) 生成 mPEG．PCL-NHS，再将mPEG—PCL-NttS同枝化聚乙烯亚胺 (PE1)反应生成三元共聚物mPEG—PCL．g—PEI。应 用傅里叶变换红外光谱 (FTIR)、核磁共振 (NMR)和凝胶渗透色谱 (GPC)对聚合物 mPEG—PCL．g．PEI进行结 构表征；通过复凝聚法制备 mPEG—PCL．g．PEI／siRNA纳米粒，并测定其粒径和 zeta电位；通过体外细胞 MTT测 试，比较 mPEG—PCL．g．PEI／siRNA 纳米粒和 PEI／siRNA 纳米粒的细胞毒性；通过体外细胞转染实验，考察不同 NP／比的mPEG—PCL．g—PEI／siRNA纳米粒对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制效率。结果表明，合成的三元聚合物 (mPEG5k—PCL12k)14一g—PEIl0k能压缩 siRNA形成粒径为50~200nm的纳米粒，其表面带有正电荷。MTT分析结 果显示 (mPEG5k—PCLl2k)l4一g．PEIlok／siRNA纳米粒的细胞毒性显著小于PEIloK／siRNA纳米粒 0．05)。当N／P 比在 50～150，萤火虫荧光素酶基因的表达显著下调 (P0．O1)。当NP／比为 125时，萤火虫荧光素酶基因表达 的抑制效率最大。聚合物mPEG—PCL．g．PEI能递送 siRNA进入细胞，抑制靶基因表达，且细胞毒性较低，有望成 为 一种新型的siRNA递送载体。 关键词：小干扰核糖核酸；载体：聚合物：纳米粒；转染 中图分类号：R943 文献标识码：A 文章编号：0513—4870(2011103—0344．06 SmallinterferingRNA deliverymediatedbymPEG--PCL-·g--PEI polymernanoparticles HUANGWei，LOMing，GAOZhong．gao ，JINMing-ji，YANGChang—qing2 f．InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciences＆PekingUnionMedicalCollege,Bejiing100050,China 2．CollegeofPharmaceuticalSciences，YanbianUniversity,Yanji133000,China) Abstract：Theaim ofthispaDeristoreportthesynthesisofthemPEG．PCL—g—PEIcopolymersassmall interferingRNA (siRNA)deliveryvector，andexplorationofthesiRNAdeliverypotentialofmPEG—PCL—g—PEI in vitro． The diblock copolymersmPEG—PCL一0H wasprepared through thering—opening polymerization． Then，thehydroxylterminal(．OH)ofmPEG—PCL一0Hwaschemicallyconvertedintothecarboxy(一COOH1and N-hydroxysuccinimiderNHS)