RP-HPLC法测定新乡种植红豆杉树皮中的紫杉醇.pdfVIP

第29卷 第3期 河 南 科 学 Vol_29 No．3 2011年 3月 HENAN SCIENCE Mar．2011 文章编号：1004—3918(2011)03—0288—03 RP—HPLC法测定新乡种植红豆杉树皮中的紫杉醇 赵俊宏 ， 李文锋 ， 樊燕鸽 ， 薛宝玉 ， 杨 静 z (1．河南省科学院化学研究所有限公司，郑州 450002； 2．河南中医学院 药学院，郑州 450008) 摘 要： 目的：首次确立了新乡种植红豆杉树皮中紫杉醇的测定方法．方法：反相高效液相色谱法 (RP—HPLC)， AgilentTC—Cl8色谱柱 (250．0mnix4．6mm，5 m)；流动相：V(乙腈)：V(水)=50：50；流速：1mLm／in；检测波长：227nm． 结果：紫杉醇的线性范围为：0．04Ixg～1．2txg，r=0．999；平均回收率为99。68％，RSD=2．43％．结论：新乡种植红豆杉 树皮中紫杉醇平均含量为0．0395％(n=4)．本法操作简便、准确，重现性好，为新 乡种植红豆杉提取紫杉醇的测定 及其质量控制的提供 了方法依据 ． 关键词：紫杉醇；反相高效液相；红豆杉 中图分类号：O657．7十2 文献标识码：A 紫杉醇 (paclitaxel，商品名Taxo1)是最早是由美国wani等于 1971年首先从短叶红豆杉中分离出的二萜 类成分[11．1992年 12月，紫杉醇通过了美国FDA批准，成为晚期卵巢癌和乳腺癌 的治疗药物 ．紫杉醇作为 近年来发现的抗癌新药2．『3】已经被成功地广泛应用于多种恶性肿瘤的治疗 ．截至 目前，短短十几年来，紫杉 醇市场 占有量就 已高达 30％，因此紫杉醇药物的市场前景相当乐观． 目前，紫杉醇的主要来源是从红豆杉属植物的茎皮4]【中提取．由于红豆杉生长缓慢，且红豆杉中紫杉醇 的含量很低 ，一般为 0．01％一0．069％，平均 0．015％(质量分数)．紫杉醇含量的高低可作为评价红豆杉类植 物资源价值和药用价值的指标，采用反相高效液相色谱法 (RP—HPLC)测定新乡种植红豆杉 中的紫杉醇含 量，方法准确度高，步骤简单，重现性好，可 以用来控制新乡种植红豆杉的质量 ． 1 仪器与试剂 DionexSummitHPLC高效液相色谱仪，Chrome-Leon6．70英文版色谱工作站，P680ALPG泵，UVD170U紫 外检测器．红豆杉树皮样品来 自新乡市紫金隆药业有限公司，样品经干燥后粉碎过40目筛，备用．99％紫 杉醇 (Taxo1)由上海金和生物技术有限公司提供．乙腈为色谱级，其余试剂均为国产分析纯试剂；超纯水． 2 方法与结果 2．1 色谱条件 Agilent色谱柱 (型号TC—C。8250mm~4．6mm，5 m)，流动相 (乙腈)：V(水)=50：50，流速 1．0mL／min， 紫外检测波长227nm[]； 进样量为 10IxL；柱温为 35℃用．在该色谱条件下， 紫杉醇被洗脱且达到基线 分离，保留时间为 14．749min (见图 1、图2)．根据色谱 保留值规律和光谱特征吸收 曲线综合定性，确定供试品 0．0 5．0 10．0 15．0 20．0 25．0 液相色谱 图中 14．749min 图1 紫杉醇标准品液相图 图2 供试品液相色谱图 ’ 峰为紫杉醇 ． Fig．1 HPLCchromatogram ofstandardTaxol Fig．2 HPLC chromatogram ofsampleforstudying 收稿 日期：2011-01—24 基金项 目：郑州市普通科技攻关项 目(10PTGN446) 作者简介：赵俊宏 (1980一)，男，河南安阳人，助理研究员，硕士，研究方向为天然药物的分离、提取与分析． 2011年 3月 赵俊宏等：RP—HPLC法测定新乡种植红豆杉树皮中的紫杉醇 一289— 2．2 紫杉醇对照品标准母液的制备 精密称取干燥至恒重的99％紫杉醇对照品0．0250g，用色谱乙腈 (