槲皮素保护少突胶质前体细胞缺氧低糖损伤的体外研究.pdfVIP

· 338 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2011Mar；27(3)：338—41 槲皮素保护少突胶质前体细胞缺氧低糖损伤的体外研究 王兴启，刘 轩，杨丽华，于红丽，翟 ，刘 静，姚瑞芹 (徐州医学院神经生物学教研室，江苏徐州 221002) 中国图书分类号：R一332；11284．1；R322．81；R329．24；R743．31 护效果。 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2011)03—0338一O4 1 材料与方法 摘要：目的 观察槲皮素 (quercetin，QUE)对 Na：S：O 联合 1．1 材料 新生 1～2dSD大鼠(早6不拘)，由徐 低糖培养基诱导少突胶质前体细胞(oligodendrocytepreeursor 州医学院实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK cells，OPCs)缺氧低糖损伤的保护作用。方法 建立 OPCs (苏)2005—0005；使用许可证号：SYXK(苏)2005— 缺氧低糖损伤模型 (OGD)；在所建模型基础上，通过检测 0018；DMEM／F12(1：1)、重组人碱性成纤维细胞生 OPCs相对存活率、LDH漏出率及观察细胞形态学变化，研究 长因子和重组人血小板衍化生长因子均购于Gibco 槲皮素对OPCs缺氧低糖损伤的保护作用 ，并比较QUE共孵 育和预孵育对 OPCs的保护效果。结果 随OPCs损伤时间 公司；槲皮素购于Sigma公司；胎牛血清(FBS)购于 延长细胞凋亡数量增多，而 QUE能提高OPCs相对存活率、 杭州四季青生物工程材料有限公司；兔多克隆抗体 降低 LDH漏出率并改善其形态学变化，其神经保护作用有 A2B5购于武汉USCNSCIENCES公司；连二亚硫酸 剂量效应 ，且共孵育比预孵育的保护效果更明显。结论 槲 钠购于南京博湃生物技术有限公司；CCK-8检测试 皮素可通过提高OPCs相对存活率及减少LDH漏出率对缺 剂盒购于南京凯基生物科技发展有限公司；乳酸脱 氧低糖损伤的OPCs发挥保护作用。 氢酶(LDH)测定试剂盒及 AnnexinV—FITC／PI凋亡 试剂盒购于南京建成生物工程研究所。 关键词：槲皮素 ；少突胶质前体细胞；缺氧低糖；Na2SO ；保 1．2 细胞培养 高纯度OPCs分离、纯化和培养， 护作用；体外研究 ；大鼠 参照Chen等 的方法。 1．3 建立缺氧低糖损伤模型 纯化的OPCs培养3 研究发现，缺血缺氧可以导致脑氧化损伤、兴奋 d后弃去培养基，漂洗 2次后加入含2mmol·L 毒性损伤、炎症反应等并可能诱发脑室周围白质软 化病 。。 (periventricularleukomalacia，PVL)。OPCs NaSO 的低糖培养基继续培养，旋紧瓶 口，正常对 照组仍用原来方法培养。AnnexinV．FITC／PI试剂 受损和神经纤维脱髓鞘是 PVL的最大特征。中枢 盒检测对照组、0．5h组、1h组和 1．5h组的细胞凋 神经系统能够通过诱导OPCs分化为成熟的少突胶 亡情况 。 质细胞进行髓鞘再生。因此，保护和减少 OPCs损 1．4 CCK-8法检测细胞存活率 检测 1～