湖北省部分肉鸡场致病性大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析.pdfVIP

动物医学进展 ，2011，32(3)：I28一l3l ProgressinVeterinaryM edicine 湖北省部分肉鸡场致病性大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析 罗 玲，杨 峻，艾地云，王红琳，罗青平，温国元，张蓉蓉，廖永红，张 琳，邵华斌 (湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430064) 摘 要：对湖北省部分肉鸡场的大肠埃希茵病流行病学进行调查 ，从采集的 5O份发病及死亡鸡肝脏 心 脏和气囊中共分离出21株大肠埃希菌，对其培养特性 、形态特征、生化特性、致病性进行 了研究，初步鉴定为 大肠埃希菌。同时对分离的 21株大肠埃希茵的 。群抗 原进行 了血清型鉴定，其 结果为 10株 078、6株 ol8，2株 Ol，还有3株有待于进一步的血清型鉴定。动物试验表明，已鉴定出血清型的 18株大肠埃希菌均 有不同程度的致病性。选择临床上常用的 l5种 药物进行药敏试验 ，结果显示鸡大肠埃希茵的耐药性 已经到 了非常严重的程度 。 关健词 ：致病性大肠埃希菌i血清型；分 离鉴定；耐药性；肉鸡 中囤分类号 ：$852．612 文献标识码 ：B 文章编号 ：i007—5038(2011)03—0128—04 鸡大肠埃希菌病是由致病性血清型的大肠埃希 1．I．5 药敏纸片 庆大霉素 (GEN)、卡那霉素 菌引起的感染综合征 ，该病在临床剖检上主要表现 (KAN)、阿莫西林 (AMO)、环丙沙星 (CIP)、四环素 为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎 。随着养鸡业 的 (TET)、头孢肤肟 (ZIN)、头孢噻吩 (CEF)、恩诺沙 发展和集约化程度的 日益提高 ，鸡大肠埃希菌病 的 星(ERFX)、复方新诺 明(T-S)、氟苯尼考 (F—F)、多 发生 日趋严重，给养鸡业造成 了严重 的经济损失。 黏菌素 B(P—B)、强力霉 素 (VIB)、磺胺异 口恶唑 大肠埃希菌的血清型众多 ，世界许多国家经过详细 (SFZ)、菌必治 (FLU)、头孢氨噻肟 (CEF_S)，为杭州 调查确定最常与禽病有关的血清型是 01、02、O35 微生物试剂有限公司产品。 和 O78。在我国关 于鸡大肠埃希菌病 的报道很多， 1．1．6 小鼠 l5g～17g小 鼠(雌雄各半)购 自湖 且 已报道各地大肠埃希菌流行的菌株有很大差异 ， 北省实验动物研究中心。购买 回来后饲养观察，无 但是关于肉鸡大肠埃希菌病少见系统报道 。本研究 任何发病症状，用于后续试验。 对湖北省部分地区肉鸡场的大肠埃希菌病进行了流 1．2 方法 行病学调查 ，以便为今后进一步制备疫苗预防本地 1．2．1细菌的分离 无菌操作取病料直接划线于麦 的大肠埃希菌病提供科学依据 。 康凯琼脂上，37℃培养 18h～24h，观察结果 。从其 1 材料与方法 中挑取可疑菌落，进行革兰染色、瑞特染色，镜检 ，并 1．1 材料 划线于伊红美蓝琼脂平板上，观察菌体形态及染色 1．1．1 病料来源 采 自湖北省部分地 区肉鸡场发 特征 。 病及死亡鸡的脑 、肝脏、心脏等。 1．2．2 细菌的纯培养 从麦康凯琼脂上挑取红色、 1．1．2 细菌培养基 麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂 ， 圆形隆起、光滑的菌落在新 的麦康凯琼脂上划线， 为杭州微生物试剂有限公司产品；普通营养琼脂 、普 37℃培养 18h～24h，观察结果 ，再次染色、镜检。 通营养肉汤为 自制 。 若菌体形态和染色特性符合大肠埃希菌的形态和染 1．1．3 生化试验微量发 酵管 杭州微生 物试剂有 色特性时，挑取剩余的半个菌落接种于麦康凯斜面 限公司产品。 培养基 ，37℃培养 18h～24h，然后取出置4℃冰箱 I．1．4 大肠埃希菌标准 。抗原单