磷脂型DHA对肿瘤细胞凋亡的影响.pdfVIP

· 178 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBalletia 2011Feb；27(2)：178～82 磷脂型DHA对肿瘤细胞凋亡的影响 杨玉红，王静凤，龙腾腾，赵 芹，杨延存，马 琴，薛长湖 (中国海洋大学食品科学与工程学院，山东青岛 266003) 中国图书分类号：R282．77；R329．25；R329．28；R735．7； 1 材料与方法 R73—352：R979．1 1．1 实验材料 BALB／c6小鼠，17～22g，由北京 文献标识码 ：A 文章编号：1001—1978(2011)02—0178—05 维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证 摘要：目的 探讨磷脂型DHA(DHA—PC)的抗肿瘤生长作 号为 SCXK(京)2007—0001。 用。方法 应用超临界CO 萃取脱除胆固醇技术从鸢乌贼 人肝癌细胞系 HepG一2和 S180肉瘤细胞株，均 卵中提取 DHA．PC。采用 MTT法 、AO／EB荧光染色法和流 由山东医学科学院细胞生物学研究所提供。HepG一 式细胞术研究DHA—PC对人肝癌HepG一2细胞增殖、凋亡的 影响，并进一步利用小鼠S180移植性肿瘤模型，验证 DHA— 2细胞于 RPMI1640培养液 (含 10％小牛血清)， PC的体内抑瘤效应。结果 DHA—PC能够抑制 HepG一2细 37℃、5％CO 孵箱中培养，每 3天传代 1次。S180 胞的增殖(P0．05，P0．01)，诱导细胞凋亡，干扰细胞周 以腹水型传代，取接种后生长 良好的S180腹水，生 期 ，使细胞停滞在G。／G 期；明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长 ， 理盐水稀释，制备瘤细胞悬液，调整细胞数至4X 其平均抑瘤率达40．94％。结论 DHA—PC在体内和体外都 10 ·L_。。 对肿瘤的生长具有抑制作用。 1．2 药品和试剂 RPMI1640培养基、新生牛血 清，由美国Gibco公司提供；胆固醇，由日本和光纯 关键词：DHA—PC；抗肿瘤；凋亡；周期阻滞；人肝癌HepG一2细 药工业株式会社提供；吖啶橙 (acridineorange，AO) 胞；S180移植瘤 和溴化乙锭(ethidiumbromide，EB)，由美国Promega 公司提供；环磷酰胺 (cycl0ph0spha de，Cy)，由上海 流行病学研究结果表明¨J，恶性肿瘤的发生与 华联制药有限公司提供；其他试剂均为国产分析纯。 摄人脂肪的种类和数量密切相关。最新研究发 1．3 仪器 SFE121．50．02超临界萃取装置，江苏南 现 』，来 自海洋鱼类的DHA等n．3高度不饱和脂肪 通华兴石油仪器有限公司；6980N型气相色谱仪，美 酸(n一3PUFA)具有很好的降低肿瘤发病率的作用。 国Agilent公司；1100型液相色谱仪，美国Agilent公 磷脂型DHA(DHA．PC)主要存在于乌贼的肌肉和卵 司；LF一1型脂质体制备仪，加拿大AVESTIN公司产 中，是一种新型的天然产物，其中，DHA位于磷脂甘 品；FACS．VAN．TAGE流式细