罗格列酮对肾间质损伤的保护作用及其机制.pdfVIP

福州总医院学报 2011年 3月第 18卷第 1期 ·l3 · · 实 验 研 究 · 罗格列酮对肾间质损伤的保护作用及其机制 林 沁 顾 勇 马 骥 林善锬 前 言 2 方法 肾闯质纤维化 的病理为多种细胞外基质 (EcM)成分 2．1 实验模型及动物分组 ： 的积聚。大量体内和体外实验发现，多种细胞 因子和生长 建立左侧输尿管梗阻模型，并将雄性SD大鼠随机动物 因子与ECM合成及代谢的调节密切相关，参与了肾间质纤 随机分成五大组： (1)假手术对照组 (Sham)：假手术后 维化的发展过程，其中转化生长因子p1(TGF—p1)的地 14天大鼠；(2)假手术服大剂量罗格列酮 (30nag·kg一1·d 位尤为突出，被认为是所有进行性肾脏纤维化疾病 中导致 一 1)组 (Sham+RSG)；(3)UUO不用药组 (I兀70)；(4) 纤维化的最后的、共同的中介物，因而成为治疗的靶点。 UUO服用小剂量罗格列酮 (5mg·kg—l·d～1)治疗组 罗格列酮 (rosig／itazone，RSG)本是人工合成新型抗糖尿病 (UUO+RSG5)；(5)UUO服用大剂量罗格列酮 (30mg· 的噻唑烷二酮类 (伽 s)药物，它通过活化细胞核 内过氧 kg一1·d一1)治疗组 (uuo+RSG30)。除假手术对照组 化物酶体增殖物激活剂受体 丫(H )调控一些与脂质代 外，其余各组根据不同的干预时问细分为 3天、7天、14 谢相关的一系列基因地表达，在提高胰岛素敏感性方面发 天亚组，每组 6—8只大鼠。 挥关键性作用。但 目前在多种脏器纤维化的动物模型及体 药物以0．75％灭菌的甲基纤维素配制，于 UUO术前 外细胞模型的研究结果却显示，TZDs具有抗器官硬化的作 48小时开始以灌胃方式给药，不用药组予以等体积 0．75％ 用。在肾脏疾病研究领域，对糖尿病肾病和 5／6肾大切实 甲基纤维素灌胃，灌 胃量不大于2毫升。在不同的干预时 验动物模型，以及体外培养的系膜细胞研究，中也观察到 间点处死动物，留取左侧肾脏，肾组织分两部分，一部分 TZDs具有抗肾小球硬化的作用。而TZDs对肾间质纤维化 作光镜标本。另一部分经皮、髓质分离后置于一7O℃冻存。 的作用 目前未见报道。 2．2 肾组织 MASSON染色计算肾小管间质的纤维化 单侧输尿管梗阻模型 (1兀0『)是以进行性肾间质纤维 指数： 化为特征的动物模型，此模型相对避免 了高血压的影响和 肾组织经4％的多聚 甲醛缓冲液固定、制成石蜡切片。 高血糖、高血脂等的代谢性异常，是研究肾间质纤维化的 常规3vm切片，MAss0N染色，光镜下观察皮质肾间质基 较为理想的模型。本实验用UUO模型观察 RSG对 肾问质 质含量。采用 MoriyamaT等人的方法 4【]对 MASSON染色 炎症和纤维化中的作用。 肾组织切片进行半定量分析，具体步骤如下：采用北航医 1 材料与方法 学图象分析管理系统，在同一条件下对每张标本选取 15个 1．1 材料 ： 不重复视野 (400()，将呈现为绿色的纤维区域 (去除肾 1．1．1 实验动物： 小球和大血管)视作阳性 目标，以阳性面积与统计场总面 健康雄性Sprague—Dawley清洁级大 鼠，8周龄，体重 积的比值 (面密度)作为肾小管间质的纤维化指数。 180--200g。由复旦大学医学院实验动物中心提供