miR-106b在阿尔茨海默病中的作用机制.pdfVIP

2011年 2月 中国实验动物学报 February，2011 第 19卷 第 1期 ACTA LAB0RAT0RIUM ANIMALISSCIENTIA SINICA V0l_19 No．1 miR一106b在阿尔茨海默病中的作用机制 王海林，宗园媛，刘嘉琳，秦川 (中国医学科学院医学实验动物研究所，国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京 100021) 【摘要】 目的 探讨miR．106b在阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease，AD)发病中的作用。方法 取3月龄 和 6月龄 APP… ／PSAE9小 鼠脑组织，进行 microRNA芯片的检测 ；利用 real—timePCR检测 3、6、9月龄 APP…／ PSAE9小鼠脑组织中miR一106b的表达，对芯片检测结果进行验证；通过构建 miR．106b稳定转染细胞系和 miR一 106bknockdown研究miR一106b与TGFBR2表达之间的关系；构建TGFBR23’UTR-荧光素酶报告载体，验证 miR一 106b是否可 以直接调控 TGFBR2蛋 白的表达 ；采用 Westernblot的方法检测 APP…／APSAE9小 鼠和对照小 鼠脑组 织中TGFBR2蛋 白的表达情况。结果 miR一106b在 3月龄和 6月龄AD模型小鼠脑组织中表达升高，在 9月龄模 型小鼠脑组织中表达降低 ；通过体外实验，我们发现miR一106b与TGFBR2蛋 白的表达呈负相关；荧光素酶报告实验 表明TGFBR23’UTR序列 中包含 miR．106b的结合位点；TGFBR2蛋 白在 3…6912月龄 AD模型小 鼠脑组织 中表 达均降低。结论 miR-106b可能通过调控 TGFBR2蛋 白的表达影响TGF—B信号通路 ，从而参与AD的发病。 【关键词】 microRNA；miR．106b；阿尔茨海默病；TGFBR2；APP…／PSAE9小鼠 【中图分类号】Q95—33，R541 【文献标识码】A 【文章编号2011)01-0021—05 Doi：10．3969／j．issn2011．01．005 TheroleofmiR．106b inAlzheimer’sDisease WANGHai—lin，ZONGYuan—yuan，LIUJia-lin，QINChuan (InstituteofLaboratoryAnimalScience，ChineseAcademyofMedicalSciences，KeyLaboratoryofHuman DiseaseAnimalModels，StateAdministrationofTranditionalChineseMedicine，Beijing10021，China) 【Abstract】 Objective ToexploretheroleofmiR·106binAlzheimer’sdisease．Methods AmicroRNAarraywas usedfortheanalysisofmicroRNA expression inthebraintissueof3一month．oldand6一month．oldAPP… ／PSAE9mice．The resultsofmicroRNA arraywerevalidatedbyrealtimePCR．Theexpression correlationbetweenmiR一106b andTGFBR2 wasdetectedthroughconstructionofmiR．106b stablytransfectedSH—SY5Y celllineandmiR．106bknockdown．Todeter． minewhethermiR一106bcandi