一纤维素和纤维素酶.ppt

下列生物能分解纤维素的是（ ） ①人 ②兔 ③牛 ④蘑菇 ⑤纤维杆菌 A、①②③④⑤ B、②③⑤ C、②③④⑤ D、③⑤ 一、纤维素和纤维素酶 1. 纤维素在生物圈的分布状况 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 2.纤维素酶的组成及作用 3、纤维素的分解 能分解纤维素的微生物有各种细菌、真菌和少数放线菌。 4、纤维素酶活性的测定实验： 方法：滤纸崩溃法 C 练一练： 二、纤维素分解菌的筛选 1.纤维素分解菌的筛选方法 刚果红染色法 这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选 2.纤维素分解菌的筛选方法的原理 1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 练一练： 2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 土壤取样 1、为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？ 由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 想一想 2、如果找不到合适的环境，可将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应埋进土壤中多深？ 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。 选择培养 1.选择培养的目的 　　增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 想一想 　　思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 　　在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用 a.旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？ b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？ 是液体培养基，原因是配方中无凝固剂 有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。 2.制备选择培养基 c.你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 梯度稀释 　　按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到106 涂布培养 涂布培养 刚果红染色法 方法一： 　　先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二： 　　在倒平板时就加入刚果红 　　思考：这两种方法各有哪些优点与不足？ 挑选产生透明圈的菌落 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－ 370C培养，可获得纯培养。 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 采用单菌落（单细胞）挑取法 本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。 纤维素酶的测定方法，一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的葡萄糖进行定量的测定。 四、课题延伸