CP对大鼠全血AChE活性的影响.pdfVIP

第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 受试验物 氯氰菊酯（CP ），北京市农科院提供，含量≧95% 。 1.1.2 动物 由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，SPF 级 SD 雄性大鼠 120 只（合格证号 HNNSDC2010089 ），体重80～100 g，普通颗粒饲料喂养，自由饮水，自由采食。 1.1.3 试剂 碘化硫代乙酰胆碱，Sigma 公司提供；DTNB ，Fluka 公司提供。 1.1.4 仪器设备 酶标仪，MK-3 ，上海热电。 1.2 方法 1.2.1 试验方法 大鼠按体重随机分为 4 组，分别为阴性对照组（灌胃给予花生油）、低剂量组（按 40 mg/kg 给予氯氰菊酯）、中剂量组（按 80 mg/kg 给予氯氰菊酯）和高剂量组（按 160 mg/kg 给予氯 氰菊酯），灌胃给药，给药体积为每 100 克体重 1mL。每日给药 1 次，共 28 次。每日给药 前进行行为学和采食量观察。给药前、给药后 7、14、28 和给药结束后 7 日断尾取血约2 mL ， 肝素抗凝，测定全血乙酰胆碱酯酶活性。 1.2.2 全血 AChE 活性测定 【 】 采用碘化硫代乙酰胆碱法测定 2 。取0.5 mL全血，用磷酸缓冲液稀释至 7.5 mL，再加 缓冲液至 2.2 mL ，取 60 μL ，再加入硫代乙酰胆碱溶液 30 μL ，于 37℃水浴孵育 30 min，取 出后置于冰水浴中 30 s 以终止反应，然后以3000 rpm离心 3 min除去红细胞。取上清，转至 96 孔微量测定板中，然后加入 1 mol/L盐酸 10 μL和DTNB溶液 200 μL ，5 min 内置于酶标仪 414 nm处比色。对照管不加全血（以等体积缓冲液代替），其余步骤相同。每样测 2 次，取 均值，实验管光密度值－对照管光密度值表示酶反应速度。 1.3 统计方法 采用 SPSS11.5 软件进行分析。结果用均数±标准差（x±s ）表示。 2 结果 2.1 动物行为学观察和采食状况 低、中和高剂量组大鼠出现不同程度的食欲减退、行为迟缓、反应迟钝和精神抑制等神 经损伤症状。 2.2 全血乙酰胆碱酯酶活性 全血乙酰胆碱酯酶活性见表 1、表 2 。除给药前，各剂量组在其余时间点上AChE 活性 277 第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 均显著低于对照组（P ﹤0.05 ），且随着给药剂量升高，AChE 活性被抑制程度越深。表明 CP 对全血乙酰胆碱酯酶活性具明显抑制作用。 随着大鼠染毒时间延长，全血乙酰胆碱酯酶活性呈现下降的趋势。 表 1 给药前、给药 7、14 日全血乙酰胆碱酯酶活性 Table 1 ACHE activity of whole blood before administration and at administration day 7 and 14 组别 给药前 给药 7 日 给药 14 日 group before administration administration day 7 administration day 14 对照组 2.55±0.36 2.67±0.31 2.59±0.35 control group 低剂量组 2.57±0.44 2.21±0.26 ﹡ 2.26±0.29 ﹡ low dose group 中剂量组 2.44±0.33 2.24±0.28 ﹡ 2.05±0.32 ﹡ middle dose group 高剂量组 2.52±0.28 2.11±0.